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wind8862

银虫 (小有名气)

[交流] 农杆菌转化水稻，竹子等单子叶植物的PROTOC0L

诸位达人：
    本人实验中想检测自己获得的基因的功能，现在想转化到竹子等禾本科植物中进行验证。但本实验室没有转化农杆菌转化禾本科植物的经验，还请高手赐教。越详尽越好！
    另外，请问大家的愈伤组织是如何培养出来的？
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不动则已，一动不动！
1楼 2009-12-30 15:11:19
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wind8862

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by wuweibewin at 2010-1-18 14:56:
用茎尖转化后，通过报告基因鉴定后，确定转化为阳性后。可通过扦插、细胞培养等方式得到纯合株。
即转化成功后，通过PCR或报告基因证明阳性后，可将转化后长出的枝叶作为母本扦插和细胞培养，培养纯合株，不过扦 ...

谢谢回答，估计我是做不到纯合那一天了，呵呵 快毕业了
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不动则已，一动不动！
8楼2010-01-21 17:28:42
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wuweibewin

金虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
wind8862(金币+10,VIP+0):能否把详细步骤发来？ 1-16 18:08
我们实验室一直做农杆菌转化棉花和玉米，不过不是用的愈伤组织用的是茎尖转化法，操作简单，转化率在3%-5%左右！若需要可把基本步骤发给你！！
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wuwei_hello@163.com
2楼2010-01-16 00:24:14
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wind8862

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by wind8862 at 2009-12-30 15:11:
诸位达人：
    本人实验中想检测自己获得的基因的功能，现在想转化到竹子等禾本科植物中进行验证。但本实验室没有转化农杆菌转化禾本科植物的经验，还请高手赐教。越详尽越好！
    另外，请问大家的愈伤组织是 ...

我的邮箱abcman001@126.com
希望您能把详细步骤发给我，还有转化到看到结果需要多少时间呢？
谢谢
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不动则已，一动不动！
3楼2010-01-16 18:09:22
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wuweibewin

金虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
wind8862(金币+10,VIP+0):非常感谢，但我的材料是竹子，不会开花的。怎么能得到纯合的下一代呢？ 1-18 11:39
有温室的话，得到第二代才是纯合体，也就是说至少得一个植物生活周期（至结实），才能得到纯和种子，种子在种下去就是纯合体了！
你的农杆菌质粒应该已经够建好了吧！
实验原理性 东西去《植物基因工程》上找，我们转化的步骤给你发到邮箱里去了！
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wuwei_hello@163.com
4楼2010-01-16 19:13:25
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