应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】感受态细胞制备出了点问题
221/3返回列表123下一页
查看: 1372  |  回复: 21
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

hutingting

银虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】感受态细胞制备出了点问题

我做的是制备感受态细胞，DH5α，用的培养基是LB ，在摇床上37°C培养了8个小时，还是没有长出菌来,怎么回事啊
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2009-12-29 18:38:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

diaoyuhua

金虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
hutingting(金币+2):谢谢参与
1949stone(金币+1,VIP+0):maybe 12-29 20:04
hutingting(金币+2,VIP+0): 12-30 21:13
那是菌种的问题，考虑重新选种吧
赞一下(13人) 回复此楼
2楼2009-12-29 18:43:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dy_414

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
hutingting(金币+2):谢谢参与
hutingting(金币+2,VIP+0): 12-30 21:14
可能培养基里有抗生素？
赞一下(2人) 回复此楼
我坚信，rp是攒出来的
3楼2009-12-29 19:24:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

j2

木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
hutingting(金币+2):谢谢参与
1949stone(金币+1,VIP+0):有道理 12-29 20:05
hutingting(金币+2,VIP+0): 12-30 21:14
重新接种一次试试，不行的话可能菌种问题，或者如楼上所言有抑菌物质存在
赞一下(12人) 回复此楼
修炼ｉｎｇ，当虫仙……
4楼2009-12-29 19:56:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★ ★
hutingting(金币+2):谢谢参与
1949stone(金币+2,VIP+0):细致 12-29 20:05
hutingting(金币+2,VIP+0):谢谢，我等了7个小时，长出来了，只是后面的转化还没做，还不知道结果咋样 12-30 21:15
1、LB培养基配置的没有问题吧？
2、是从平板上挑的单菌落吗？
3、菌种有没有问题？
4、接种量有多少？
正常情况下3-4小时就可以到0.4-0.5了。
赞一下(11人) 回复此楼
5楼2009-12-29 20:02:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaozx123

金虫 (小有名气)
★
hutingting(金币+2):谢谢参与
应该是菌种有问题了。建议重新接种，或者先拿别人的菌种试一下了。
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2009-12-29 20:04:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主
★
hutingting(金币+2):谢谢参与
你是里面转有质粒的还是就是空菌摇的，你是不是加错抗生素了啊
赞一下(1人) 回复此楼
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
7楼2009-12-29 21:26:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
★ ★ ★ ★
hutingting(金币+2):谢谢参与
amisking(金币+3,VIP+0): 1-16 22:29
我用DH5α做感受态细胞的时候是从平板上接种到指形瓶里，摇到大概1.0，此时正处在对数期，再接种到三角瓶里扩大培养的。5楼的朋友说的3-4小时就可以到0.4-0.5，这和我的扩大培养步骤里的情况相似，虽然我需要的时间还是久了些，但是差异应该不显著。直接用牙签挑保存在冰箱里的平板上的菌接种到3角瓶里的话，8小时还没有看得出明显生长是很正常的，因为接种量不够大，而且细胞本来在休眠，迟缓期比较长。
赞一下(21人) 回复此楼
流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
8楼2009-12-30 00:10:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yang0071

木虫 (职业作家)
★
hutingting(金币+2):谢谢参与
起始接种量是多少？
牙签挑的话，至少12小时肉眼观察才比较明显
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2009-12-30 08:49:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyong1981

金虫 (正式写手)
★
hutingting(金币+2):谢谢参与
1.菌种问题
2.有病毒污染
3.培养基的问题
赞一下(1人) 回复此楼
10楼2009-12-30 14:00:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 hutingting 的主题更新
221/3返回列表123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 FChKX8meu1ds 2026-11-09 6/300 2026-11-11 01:32 by Z7qfCsdIiD1T
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 cqv1zKnzd7hr 2026-11-09 6/300 2026-11-11 01:21 by Z7qfCsdIiD1T
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 cqv1zKnzd7hr 2026-11-09 6/300 2026-11-11 01:15 by Z7qfCsdIiD1T
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 0TEMgxdT1eIw 2026-11-09 6/300 2026-11-11 01:13 by Z7qfCsdIiD1T
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 0TEMgxdT1eIw 2026-11-09 5/250 2026-11-11 01:04 by Z7qfCsdIiD1T
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 6/300 2026-11-11 01:02 by Z7qfCsdIiD1T
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 5/250 2026-11-11 00:59 by Z7qfCsdIiD1T
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 FChKX8meu1ds 2026-11-09 4/200 2026-11-10 21:02 by Z7qfCsdIiD1T
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 FChKX8meu1ds 2026-11-09 4/200 2026-11-10 20:51 by Z7qfCsdIiD1T
[考研] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 cqv1zKnzd7hr 2026-11-09 5/250 2026-11-10 20:18 by Z7qfCsdIiD1T
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 cqv1zKnzd7hr 2026-11-09 5/250 2026-11-10 20:12 by Z7qfCsdIiD1T
[教师之家] 延安大学回应“副教授留绝笔信”：确已离世，正核实举报内容 +4 yexuqing 2026-11-04 6/300 2026-11-10 11:13 by susizheng
[文学芳草园] 厉娜 +3 张丹枫1991 2026-11-09 5/250 2026-11-09 16:53 by 张丹枫1991
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +5 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 16/800 2026-11-09 11:47 by GwrQVVR6Oenx
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 10/500 2026-11-09 08:00 by IhnEQauGmT3K
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 8/400 2026-11-09 00:14 by l48hFd8Nwae2
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 9/450 2026-11-08 22:46 by l48hFd8Nwae2
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 10/500 2026-11-06 16:12 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +6 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 12/600 2026-11-06 16:10 by 5sJFDKp2kwuI
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 9/450 2026-11-06 02:02 by qL1cU46YIdK0
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭