【求助/交流】感受态细胞制备出了点问题 - 分子生物 - 综合其他

11楼2009-12-30 14:21:02

fungixx

至尊木虫 (文坛精英)

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支持楼上的1和3

几年前踏上火车那一刻都还没有意识到,从此故乡只有冬夏,再无春秋

12楼2009-12-30 14:23:01

hutingting

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Originally posted by yang0071 at 2009-12-30 08:49:
起始接种量是多少？
牙签挑的话，至少12小时肉眼观察才比较明显

谢谢大家！

13楼2009-12-30 21:19:06

hutingting

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很抱歉，我帖子的写错了个字，是6个小时，没长出来，不是8

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14楼2009-12-30 21:21:34

zhuifeng7000

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你不会直接把单菌落接的摇瓶吧？一般要从试管转接的。

15楼2009-12-30 21:37:01

qiang84zhang

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这是很少见的，因为LB基本上都是没什么问题的！要是有问题就应该是你的菌种有问题，为了验证这一点，你可以在别的实验室要此种菌在你的LB中生长，看情况是否与你的结果一致！
菌种出问题的话，要考虑到菌种是否老化，即将菌接在LB中，一直放在那，看是否一直不长（一般只是时间问题，都应该会长），如果老化，就要重新划板子子，来过！

16楼2009-12-31 11:16:30

lixg

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从-70度冰箱取出的少许原菌液应先在平板上过夜活化，最好是再从平板上挑取菌落活化第二次，然后挑选2-3个菌落摇菌才可进行感受态制备。

17楼2009-12-31 15:14:22

nklyw

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很可能是菌种的问题。我一般是用2YT 培养基来养13H，再转接到新的2YT培养基养3h，使细菌完全处于对数期，再集菌做感受态。做出来的感受态活性都很好啊。

18楼2009-12-31 23:20:16

hutingting

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引用回帖:

Originally posted by zhuifeng7000 at 2009-12-30 21:37:
你不会直接把单菌落接的摇瓶吧？一般要从试管转接的。

谢谢你，我新来的，不知道该怎么给你奖励金币，会尽快给你的

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19楼2010-01-16 22:22:29

hutingting

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引用回帖:

Originally posted by qiang84zhang at 2009-12-31 11:16:
这是很少见的，因为LB基本上都是没什么问题的！要是有问题就应该是你的菌种有问题，为了验证这一点，你可以在别的实验室要此种菌在你的LB中生长，看情况是否与你的结果一致！
菌种出问题的话，要考虑到菌种是否老 ...

谢谢，我会尽快奖励金币

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20楼2010-01-16 22:23:12