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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】感受态细胞制备出了点问题
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咕噜丫丫

新虫 (初入文坛)
★
hutingting(金币+2):谢谢参与
基本上是菌种的问题
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11楼2009-12-30 14:21:02
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fungixx

至尊木虫 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主
★
hutingting(金币+2):谢谢参与
支持楼上的1和3
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几年前踏上火车那一刻都还没有意识到,从此故乡只有冬夏,再无春秋
12楼2009-12-30 14:23:01
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hutingting

银虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by yang0071 at 2009-12-30 08:49:
起始接种量是多少？
牙签挑的话，至少12小时肉眼观察才比较明显

谢谢 大家！
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13楼2009-12-30 21:19:06
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hutingting

银虫 (正式写手)
很抱歉，我帖子的写错了个字，是6个小时，没长出来，不是8
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14楼2009-12-30 21:21:34
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zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
你不会直接把单菌落接的摇瓶吧？一般要从试管转接的。
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15楼2009-12-30 21:37:01
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qiang84zhang

银虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
这是很少见的，因为LB基本上都是没什么问题的！要是有问题就应该是你的菌种有问题，为了验证这一点，你可以在别的实验室要此种菌在你的LB中生长，看情况是否与你的结果一致！
菌种出问题的话，要考虑到菌种是否老化，即将菌接在LB中，一直放在那，看是否一直不长（一般只是时间问题，都应该会长），如果老化，就要重新划板子子，来过！
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16楼2009-12-31 11:16:30
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lixg

铁杆木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
从-70度冰箱取出的少许原菌液应先在平板上过夜活化，最好是再从平板上挑取菌落活化第二次，然后挑选2-3个菌落摇菌才可进行感受态制备。
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17楼2009-12-31 15:14:22
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nklyw

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
很可能是菌种的问题。我一般是用2YT 培养基来养13H，再转接到新的2YT培养基养3h，使细菌完全处于对数期，再集菌做感受态。做出来的感受态 活性都很好啊。
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18楼2009-12-31 23:20:16
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hutingting

银虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by zhuifeng7000 at 2009-12-30 21:37:
你不会直接把单菌落接的摇瓶吧？一般要从试管转接的。

谢谢你，我新来的，不知道该怎么给你奖励金币，会尽快给你的
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19楼2010-01-16 22:22:29
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hutingting

银虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by qiang84zhang at 2009-12-31 11:16:
这是很少见的，因为LB基本上都是没什么问题的！要是有问题就应该是你的菌种有问题，为了验证这一点，你可以在别的实验室要此种菌在你的LB中生长，看情况是否与你的结果一致！
菌种出问题的话，要考虑到菌种是否老 ...

谢谢 ，我会尽快奖励金币
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20楼2010-01-16 22:23:12
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