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358219418金虫 (正式写手)
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[交流]
【求助/交流】请教高手，谢谢
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我做的基因编码的氨基酸N端有信号肽，预测蛋白分子量68kD。构建的重组质粒为peT-32-a重组质粒，转入BL21后提质粒，PCR和双酶切鉴定都没问题。 将重组菌37度摇床培养，5小时后加IPTG终浓度0.1mM，诱导5小时后取1mL离心，弃上清，加PBS，加上样buffer,100度，3分钟，离心后加样跑SDS-PAGE。染色脱色后没有目的蛋白，什么原因。 麻烦高手指点，十分感谢哈！ |
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5楼2009-12-30 00:22:45