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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 【讨论】色谱柱的冲洗
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yzy_0106

金虫 (小有名气)

[交流] 【讨论】色谱柱的冲洗

流动相是缓冲盐，每次使用后用10%甲醇冲洗的，当时就听人说洗20min就可以，现在觉得时间不够，因为柱子比较长，30cm。有点担心啊，请问有什么可以解决的办法啊？柱子已经用了一段时间了，会不会坏了啊？

[ Last edited by yzy_0106 on 2009-12-29 at 10:59 ]
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1楼 2009-12-29 10:58:40
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hyggelig

银虫 (小有名气)
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opq691(金币+2,VIP+0):谢谢回帖交流 12-29 19:26
如果担心坏的话，可以低流速0.5或者0.3ml/min
用90%水：10%甲醇冲洗150min或者更长
然后梯度走到100%甲醇，再冲洗久一点，应该还好吧
如果你的buffer是磷酸盐类的东东，以后在冲洗色谱柱的时候建议还是冲洗久一点吧
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2楼2009-12-29 11:05:18
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yzy_0106

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by hyggelig at 2009-12-29 11:05:
如果担心坏的话，可以低流速0.5或者0.3ml/min
用90%水：10%甲醇冲洗150min或者更长
然后梯度走到100%甲醇，再冲洗久一点，应该还好吧
如果你的buffer是磷酸盐类的东东，以后在冲洗色谱柱的时候建议还是冲洗久一 ...

谢谢啊！不明白的是为什么要走一个梯度呢？
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3楼2009-12-29 11:10:49
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luomuwuhen

金虫 (著名写手)
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opq691(金币+2,VIP+0):谢谢回帖交流 12-29 19:27
我们用的柱子是25cm的，一般如果流动相里含缓冲盐，都是用10%甲醇冲半小时，再换纯甲醇冲20分钟。不过个人觉得冲10%甲醇也不必非得很长时间，估计把柱子中的盐都冲出来就行了，如果你用的时间比较短，可以增大下流速，比如从1ml增大到1.2ml或者1.5ml
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药物合成
4楼2009-12-29 13:14:09
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ljh616528

金虫 (正式写手)
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opq691(金币+1,VIP+0):谢谢回帖交流 12-29 19:27
一般是10倍柱体积吧，25cm长的一般会冲40分钟左右
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平安是福
5楼2009-12-29 14:43:06
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limeihua11

金虫 (小有名气)
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opq691(金币+1,VIP+0):谢谢回帖交流 12-29 19:27
如果是双泵的话，你可以用一个泵以100%水快速冲洗柱子，另一个甲醇同时快速冲洗这样可节省洗柱时间。
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meihuali11
6楼2009-12-29 14:59:48
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zhongweixu

铁杆木虫 (著名写手)
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opq691(金币+1,VIP+0):谢谢回帖交流 12-29 19:30
一般情况下20分钟够了，如果有时间，长一点也没错
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7楼2009-12-29 17:08:54
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fallingash

银虫 (小有名气)
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happy169(金币+1,VIP+0):谢谢参与，欢迎常来分析版 12-30 09:16
10%甲醇稍显的高了一点,用5%以下的冲就可以,其实用纯水冲也没什么问题,现在的技术做出的柱子是能承受纯水的淋洗的.有时候系统被盐析堵的厉害了,用小流量纯水慢慢冲,很快就可以见效,加入甲醇后,效果就不太明显.
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TheShawshankRedemption
8楼2009-12-29 19:58:31
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jzlyffs

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happy169(金币+1,VIP+0):谢谢参与，欢迎常来分析版 12-30 09:16
缓冲盐本身不会损坏柱子。缓冲盐留在泵里面会造成腐蚀。并且会长菌或留在泵里过夜时会析出晶体造成堵塞。照你的说法，柱子不会有问题。
建议，你每次换上百分十的甲醇后，大流量purge排一下管路的缓冲盐，这样可以大大节约冲洗柱子的时间。
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9楼2009-12-29 22:19:56
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zhaoliping6060

金虫 (小有名气)
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happy169(金币+1,VIP+0):谢谢参与，欢迎常来分析版 12-30 09:16
我想知道是每一针后长时间冲洗呢，还是每天做完后再进行长时间冲洗。谢谢！
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10楼2009-12-30 06:33:43
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