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wangxuan

木虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】(求助)膜蛋白表达遇困难

我在做分支杆菌一种脱氢酶的表达时遇到困难,sds-page无特异条带
该酶有两段跨膜区,大小60KD ,通过PCR获得的基因反复测序是没有问题的
表达载体是PET-28a ,在BL21中表达   ,诱导温度30° /16°
我重复连接了很多次,其中一次连接后跑SDS-PAGE出现一条大约24KD的高表达条带
请教高手到底是什么问题导致我的蛋白表达不出来,是载体、宿主还是诱导温度?
跪求高手指教!!!!!
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在其位,谋其政,成其事
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thinka

铜虫 (著名写手)


wangxuan(金币+1,VIP+0): 12-25 09:13
看来楼主是测的片段,你应该够好载体,把质粒测一下看看先
2楼2009-12-24 19:48:33
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