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wangxuan木虫 (著名写手)
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[交流]
【求助/交流】(求助)膜蛋白表达遇困难
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我在做分支杆菌一种脱氢酶的表达时遇到困难,sds-page无特异条带 该酶有两段跨膜区,大小60KD ,通过PCR获得的基因反复测序是没有问题的 表达载体是PET-28a ,在BL21中表达 ,诱导温度30° /16° 我重复连接了很多次,其中一次连接后跑SDS-PAGE出现一条大约24KD的高表达条带 请教高手到底是什么问题导致我的蛋白表达不出来,是载体、宿主还是诱导温度? 跪求高手指教!!!!! |
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铜虫 (著名写手)
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