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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】谁有SDS-PAGE20%分离较的配方啊？
汕头大学海洋科学接受调剂
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谁知道

铁虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】谁有SDS-PAGE20%分离较的配方啊？

谁有SDS-PAGE20%分离较的配方啊？急需，谢谢。
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每个人一辈子从来都是一个人
1楼 2009-12-22 20:16:01
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qinfujun

捐助贵宾 (著名写手)
★
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我想应该是只改 水和30%arc/bis 的量就OK了
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2楼2009-12-22 20:31:03
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xiaochongzii

铁虫 (初入文坛)
★
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10%的分离胶：蒸馏水40.5ml；1.5Mtris 25ml（pH8.8）；10%SDS 1ml；acr/bis 33.25ml
20%的分离胶按此比例加倍即可
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3楼2009-12-22 22:25:59
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
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超过15%的PAGE胶有实际作用么……
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4楼2009-12-23 00:01:36
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谁知道

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2009-12-23 00:01:
超过15%的PAGE胶有实际作用么……

蛋白只有11KD，15%的PAGE胶分离不出来
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每个人一辈子从来都是一个人
5楼2009-12-27 21:53:47
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
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引用回帖:
Originally posted by 谁知道 at 2009/12/27, 21:53:

蛋白只有11KD，15%的PAGE胶分离不出来

那么20%的也未必，这么小的建议用梯度胶
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6楼2009-12-27 22:34:36
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fighter09

木虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
分子克隆上有这个，其实直接变比例就可以了，三楼那位虫友已经给出了配方了。估计这么大的浓度肯定凝的超快
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7楼2009-12-28 10:22:36
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者
★
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引用回帖:
Originally posted by 谁知道 at 2009-12-27 21:53:

蛋白只有11KD，15%的PAGE胶分离不出来

建议不要用20%的，
有专门走小分子蛋白的胶，你很容易google到。Tricine---什么的。

关键词： 小分子蛋白的胶  Tricine

另外，你们学校维普上也很多此类文章，下面就是一篇。

http://www.lw23.com/pdf_6ceee037 ... 064e2760/lunwen.pdf
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【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
8楼2009-12-28 11:33:18
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cornerqian

木虫 (小有名气)
★
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用15%分离胶，分离胶缓冲液用3MTris-HCl试试。
20%分离胶应该是在10%分离胶的基础上把贮液加倍，减少水的量（如果配10ml，减去其他试剂的体积就是需要加的水量）
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9楼2009-12-29 16:20:01
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gaozx123

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
同意8楼看法，有专门跑小分子量的蛋白胶方法，可以找一下。20%的胶确实很少见有人用过。不过楼主可以试一下。
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10楼2009-12-29 16:48:44
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