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谁知道

铁虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】谁有SDS-PAGE20%分离较的配方啊?

谁有SDS-PAGE20%分离较的配方啊?急需,谢谢。
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qinfujun

捐助贵宾 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我想应该是只改 水和30%arc/bis 的量就OK了
2楼2009-12-22 20:31:03
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xiaochongzii

铁虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
10%的分离胶:蒸馏水40.5ml;1.5Mtris 25ml(pH8.8);10%SDS 1ml;acr/bis 33.25ml
20%的分离胶按此比例加倍即可
3楼2009-12-22 22:25:59
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
超过15%的PAGE胶有实际作用么……
4楼2009-12-23 00:01:36
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谁知道

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2009-12-23 00:01:
超过15%的PAGE胶有实际作用么……

蛋白只有11KD,15%的PAGE胶分离不出来
每个人一辈子从来都是一个人
5楼2009-12-27 21:53:47
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 谁知道 at 2009/12/27, 21:53:

蛋白只有11KD,15%的PAGE胶分离不出来

那么20%的也未必,这么小的建议用梯度胶
6楼2009-12-27 22:34:36
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fighter09

木虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
分子克隆上有这个,其实直接变比例就可以了,三楼那位虫友已经给出了配方了。估计这么大的浓度肯定凝的超快
7楼2009-12-28 10:22:36
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者


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引用回帖:
Originally posted by 谁知道 at 2009-12-27 21:53:

蛋白只有11KD,15%的PAGE胶分离不出来

建议不要用20%的,
有专门走小分子蛋白的胶,你很容易google到。Tricine---什么的。

关键词: 小分子蛋白的胶  Tricine

另外,你们学校维普上也很多此类文章,下面就是一篇。

http://www.lw23.com/pdf_6ceee037 ... 064e2760/lunwen.pdf
【我一直认为做土匪很性感很坏,很直接,可以大声喊:JCMM我爱你!所以,我自从博士毕业后,就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
8楼2009-12-28 11:33:18
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cornerqian

木虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
用15%分离胶,分离胶缓冲液用3MTris-HCl试试。
20%分离胶应该是在10%分离胶的基础上把贮液加倍,减少水的量(如果配10ml,减去其他试剂的体积就是需要加的水量)
9楼2009-12-29 16:20:01
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gaozx123

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
同意8楼看法,有专门跑小分子量的蛋白胶方法,可以找一下。20%的胶确实很少见有人用过。不过楼主可以试一下。
10楼2009-12-29 16:48:44
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