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yujiaping1

木虫 (著名写手)

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[交流] 【求助/交流】Clonetech 的RACE PCR可以不用推荐的热启动酶吗？如何手动热启动

我买了一个Clonetech的SMARTer RACE cDNA扩增盒子，发现和原来的不一样了，不再赠送Advantage polymerase了，需要单独订，可是急需要马上继续实验，不知道用普通的Taq酶行不行，如何手动热启动？望高手指点，谢谢了

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1楼 2009-12-22 13:07:22

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shuxian1

银虫 (小有名气)

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★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖

请问你们用Clonetech SMARTer RACE做5‘有没有做出来啊，能不能发个你们操作的详细过程，最近做5’用UPM扩出的条带弥散，有很多条带，而且我的特异引物Tm是61度，不知道能不能扩出来，还是设计的特异引物Tm值必须在70度以上啊？说明书上写到Tm值在60-70度之间的可以用常规PCR，退火是68度，不知道有没有人用这个程序做出来的？谢谢各位虫友帮忙，实验很急！