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[交流]
【求助/交流】有氯霉素抗性的土壤杆菌吗,大家帮忙分析一下原因
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我在做C58的基因敲除,敲除载体构建好转化C58后在氯霉素平板上筛选,但是空白在氯霉素浓度450mg/L的平板上还长菌,这个浓度太高了,我见过的氯霉素就是170mg/L最高,我的感受态为OD600=0.5的菌液25ml收集一管200微升,电击转化,2000v,达到5ms,我同时转了别的质粒,证明这个条件能转进去;现在我怀疑它是氯霉素抗性的菌。 载体构建好做转化三个月了,一直没有筛到菌,我的同源臂有500和600bp一对,800和900bp一对,要敲除两个基因,太郁闷了,原本以为载体构建出来就能转化出突变株,有做过的给点建议,谢谢。 [ Last edited by haylig on 2009-12-21 at 21:56 ] |
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scelab
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