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[交流]
【求助/交流】有氯霉素抗性的土壤杆菌吗，大家帮忙分析一下原因
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我在做C58的基因敲除，敲除载体构建好转化C58后在氯霉素平板上筛选，但是空白在氯霉素浓度450mg/L的平板上还长菌，这个浓度太高了，我见过的氯霉素就是170mg/L最高，我的感受态为OD600＝0.5的菌液25ml收集一管200微升，电击转化，2000v，达到5ms，我同时转了别的质粒，证明这个条件能转进去；现在我怀疑它是氯霉素抗性的菌。 载体构建好做转化三个月了，一直没有筛到菌，我的同源臂有500和600bp一对，800和900bp一对，要敲除两个基因，太郁闷了，原本以为载体构建出来就能转化出突变株，有做过的给点建议，谢谢。 [ Last edited by haylig on 2009-12-21 at 21:56 ] |
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