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汕头大学海洋科学接受调剂
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yoyoyehan

[交流] 【求助/交流】原核表达引物问题

利用双酶切分别切载体和目的基因,然后连接,构建原核表达载体,通过pcr方法已经检测到了目的基因,并且重组质粒送去测序。请问大家:我设计的引物不包含ATG起始密码子,上游引物的3‘端在ATG中A的前面第三位,我的目的基因还能正确表达么?因为起始密码子被破坏了,
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liubang8355

金虫 (小有名气)

可以表达
2楼2009-12-18 00:02:03
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wulei0708

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
也可能表达,因为载体上有起始密码子,只要你所用的酶没有把他切除
3楼2009-12-19 00:17:41
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zuodongyun

铁杆木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
可以表达,但是注意酶切位点要是与载体的读码框一致,如不一致可以人工添加几个碱基,否则你的基因会发生移码突变,翻译的产物会发生完全的变话
4楼2009-12-19 10:04:28
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qqsvery

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
上游引物的3‘端在ATG中A的前面第三位,举个例子,是下面这种情况吗?
ATTTCGCGAATCGATG
TAAAGCGCTTA
谎言和真实在河边洗澡,谎言先洗好,穿走了真实的衣服,真实却不肯穿谎言的衣服。后来人们眼里只有穿着真实衣服的谎言,却很难接受赤裸裸的真实。
5楼2009-12-19 13:47:19
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