24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 1351  |  回复: 17
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

刘仕博

金虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】昨天看了本韩国的实验技术的书,把我吓了一跳!

最近因为那个破real time的实验弄的我一天在这里大呼小叫的,呵呵~
昨天翻了下实验室里放的实验书,真的把我吓了一跳。
我之前找引物的时候用的黄金法则都是在网上看的咱们国内的。当时师姐倒是也给我说过,就是按那本书说的,但我那个时候对这个实验实在没有sense,她一说我一听。
昨天又去翻那本书,对PCR引物的设计规则里面有一条,就是3‘段尽量避免出现T,对A确没有什么交代。不过看看网上说的,大部分都是说避免出现A,最好是T,我就很迷惑了。
不知道哪位高手给解释下~
回复此楼
生命在于折腾~
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

刘仕博

金虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by yiyiglad at 2009-12-15 19:52:
引物3’端的末位碱基对Taq酶的DNA合成效率有较大的影响。不同的末位碱基在错配位置导致不同的扩增效率,末位碱基为A的错配效率明显高于其他3个碱基,因此应当避免在引物的3’端使用碱基A。

综上所述,韩国人脑子不太好
生命在于折腾~
3楼2009-12-15 21:12:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 18 个回答

yiyiglad

★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+3,VIP+0): 12-15 19:55
引物3’端的末位碱基对Taq酶的DNA合成效率有较大的影响。不同的末位碱基在错配位置导致不同的扩增效率,末位碱基为A的错配效率明显高于其他3个碱基,因此应当避免在引物的3’端使用碱基A。
2楼2009-12-15 19:52:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

刘仕博

金虫 (著名写手)

不过今天我们实验室的一个印度技术教授又和我说找引物的时候如果5’段是A或者T会更好些,快论证下,呵呵~
生命在于折腾~
4楼2009-12-15 21:24:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

apple-z

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
是听说引物3‘末端最好不要是A或T之类的说法,但是事实证明通常情况下影响不会很大。
5楼2009-12-16 00:15:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0856专硕求调剂 希望是a区院校 +22 好好休息好不好 2026-04-09 25/1250 2026-04-12 17:09 by ajpv风雷
[考研] 调剂 +10 月@163.com 2026-04-11 10/500 2026-04-12 09:14 by zhouyuwinner
[考研] 085404 293求调剂 +9 勇远库爱314 2026-04-08 9/450 2026-04-12 02:24 by 秋豆菜芽
[考研] 求调剂 +18 MAX怅惘 2026-04-09 20/1000 2026-04-11 23:31 by zhen~
[考研] 296求调剂 +14 汪!?! 2026-04-08 15/750 2026-04-11 20:28 by dongdian1
[考研] 本人女孩 +7 吼吼, 2026-04-10 9/450 2026-04-11 14:45 by ACS Nano——
[考研] 化学308分求调剂 +22 你好明天你好 2026-04-07 24/1200 2026-04-11 11:14 by ChemPharm
[考研] 农业管理302分求调剂 +3 xuening1 2026-04-10 3/150 2026-04-11 10:18 by zhq0425
[考研] 本科211 工科085400 280分求调剂 可跨专业 +11 LZH(等待调剂中 2026-04-10 11/550 2026-04-11 08:39 by zhq0425
[考研] 求调剂 材料与工程 324分 专硕 +19 翩翩一书生 2026-04-10 21/1050 2026-04-10 11:41 by wp06
[考研] 材料化工总分334求调剂 +16 Riot2025 2026-04-08 17/850 2026-04-09 20:19 by maddjdld
[考研] 调剂 +19 2261744733 2026-04-08 19/950 2026-04-09 19:11 by vgtyfty
[考研] 085400电子信息类(川大控制工程)求调剂可跨专业 求老师联系 +3 626776879 2026-04-08 3/150 2026-04-09 16:05 by 猪会飞
[考研] 328求调剂 +17 lftmya 2026-04-07 18/900 2026-04-09 08:05 by 5268321
[考研] 机械工程313分找工科调剂 +3 双一流本科机械 2026-04-08 3/150 2026-04-08 20:41 by 土木硕士招生
[考研] 一志愿吉大化学327求调剂 +12 王王白石 2026-04-06 13/650 2026-04-08 16:05 by luoyongfeng
[考研] 331求调剂 +5 张元一 2026-04-07 6/300 2026-04-07 22:13 by hemengdong
[考研] 生物学363调剂求助 +7 fanzhang6666 2026-04-06 9/450 2026-04-07 17:37 by lijunpoly
[考研] 材料调剂 +11 一样YWY 2026-04-07 11/550 2026-04-07 15:13 by shdgaomin
[考研] 求助 +3 卡卡东88 2026-04-06 4/200 2026-04-06 15:28 by going home
信息提示
请填处理意见