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zwj8353

[交流] 【求助/交流】杂交瘤细胞冻存

最近实验出现怪现象:冻存的杂交瘤细胞复苏来看是活的,但只要放入CO2培养箱一段时间后细胞就全部死亡,望有经验者分析原因!!
所用的冻存液是10%二甲亚砜的BSA   BSA为Hyclone的,二甲亚砜为Amresco的。
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liudaihualyh

金虫 (小有名气)

是不是污染了,因为污染后也可以复苏活的,但细菌长得快,一下就可以把细胞给弄死了。
你的bsa浓度够不够

[ Last edited by liudaihualyh on 2009-12-25 at 22:05 ]
7楼2009-12-25 22:02:52
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panfanbin

金虫 (初入文坛)


zwj8353(金币+1,VIP+0): 12-15 15:04
可能是操作原因,是否细胞保存不当或曾经无意中解冻过。
如排除以上原因,可以提高接种密度培养或额外加入生长因子在培养基中试试。
2楼2009-12-15 13:18:57
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zwj8353

我想不应该是操作原因,因为以前也同样冻存没出现过类似现象,不晓得为啥现在冻存的细胞都是死的
同一液氮罐中有最早冻存的细胞,复苏都相当好
我有尝试加生长因子,无明显效果
或者谁有正在用的具体的细胞冻存液配方和方法,让我借鉴一下,看看到底问题出在哪,在下将不胜感激!!
3楼2009-12-15 15:12:06
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zwj8353

急!!望各位帮忙啊!!
4楼2009-12-16 11:07:15
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