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[交流] 【求助/交流】杂交瘤细胞冻存

最近实验出现怪现象：冻存的杂交瘤细胞复苏来看是活的，但只要放入CO2培养箱一段时间后细胞就全部死亡，望有经验者分析原因！！
所用的冻存液是10%二甲亚砜的BSA BSA为Hyclone的，二甲亚砜为Amresco的。

1楼2009-12-15 11:33:56

急！！望各位帮忙啊！！

4楼2009-12-16 11:07:15

金虫 (初入文坛)

★
zwj8353(金币+1,VIP+0): 12-15 15:04

可能是操作原因，是否细胞保存不当或曾经无意中解冻过。
如排除以上原因，可以提高接种密度培养或额外加入生长因子在培养基中试试。

2楼2009-12-15 13:18:57

我想不应该是操作原因，因为以前也同样冻存没出现过类似现象，不晓得为啥现在冻存的细胞都是死的
同一液氮罐中有最早冻存的细胞，复苏都相当好
我有尝试加生长因子，无明显效果
或者谁有正在用的具体的细胞冻存液配方和方法，让我借鉴一下，看看到底问题出在哪，在下将不胜感激！！

3楼2009-12-15 15:12:06

金虫 (小有名气)

是不是污染了，因为污染后也可以复苏活的，但细菌长得快，一下就可以把细胞给弄死了。
你的bsa浓度够不够

[ Last edited by liudaihualyh on 2009-12-25 at 22:05 ]

7楼2009-12-25 22:02:52