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07shenhan

铁虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】旋转蒸发干燥蛋白质的问题

请教关于蛋白质旋转蒸发的问题:
旋转蒸发时是不是温度会变高?会不会破坏蛋白质?
旋转蒸发的温度控制范围是多大? 旋转蒸发干燥蛋白质时一般设置多高温度?
要蒸发掉的是六氟异丙醇(HFIP)

我是个生物实验的新手,大家帮帮忙啊!
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶


07shenhan(金币+1,VIP+0):谢谢! 12-15 17:29
蛋白质旋转蒸发?莫非用的是旋转蒸发仪?我用过来浓缩发酵液里的酶,如果温度太高确实是会使酶变性的,我用的浓缩温度不确定,如果耐热就高一点,不耐热就低一点。在做alpha淀粉酶时,因为浓缩时间超过1小时,为了避免变性,我选用的温度不超过酶的最适作用温度。

ps:我用的是水循环的泵,往里面加点冰降温后泵抽得更真空,蒸发得更快。
蒸发的液体温度一般比水浴锅里的温度低两三度。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
2楼2009-12-14 23:19:52
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duanyongzhong

银虫 (正式写手)

搞酶的,不要搞没
3楼2009-12-15 00:03:33
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anlewo7777

木虫 (正式写手)


07shenhan(金币+1,VIP+0):谢谢! 12-15 17:29
你用冻干机多好啊
4楼2009-12-15 08:30:35
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qiang84zhang

银虫 (正式写手)


07shenhan(金币+1,VIP+0):谢谢! 12-15 17:29
我们用的冷冻浓缩仪!貌似没什么问题!
5楼2009-12-15 08:52:20
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07shenhan

铁虫 (初入文坛)

我是根据参考文献上的来做的
有一篇参考文献上说 Dried and Stored at-80 °C
另一篇参考文献上说 The HFIP was removed by evaporation, and the resulting peptide was stored as a film at -20 or -80 °C.

我不知道是用旋转蒸发仪进行蒸发干燥的,还是用冷冻干燥。
高手们觉得应该是用那种方法呢???
6楼2009-12-15 17:27:58
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Annel

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
冷冻干燥好,不会破坏蛋白质
7楼2009-12-16 13:20:27
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