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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 【求助】为什么我用磷酸盐缓冲液做流动相时柱压就不稳呢？
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nyj1116

金虫 (小有名气)

未来精英

[交流] 【求助】为什么我用磷酸盐缓冲液做流动相时柱压就不稳呢？

开始用甲醇和水冲柱子还是很好的，用磷酸盐缓冲液和乙腈作流动相时进了三针后，柱压又开始调动了，最大压和最小压差别1MPa,真不明白是柱子的问题还是机器问题，开始好好的，说变就变了
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爱问问题的小蜜蜂
1楼 2009-12-14 15:54:37
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xjc1985

木虫 (小有名气)
沙发沙发
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2楼2009-12-14 16:16:29
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ronaldoli198311

至尊木虫 (正式写手)
也有可能是流动相替换不完全的问题，柱压不稳应该是仪器的原因
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3楼2009-12-14 16:34:30
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ynnbian

铁杆木虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
是采用的梯度洗脱吗，一般在梯度变化时都会出现这种情况。
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淡泊，宁静。
4楼2009-12-14 16:38:15
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sdlj82

金虫 (正式写手)

每年都拖平均工资的后腿
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢指点！ 12-14 22:38
引用回帖:
Originally posted by nyj1116 at 2009-12-14 15:54:
开始用甲醇和水冲柱子还是很好的，用磷酸盐缓冲液和乙腈作流动相时进了三针后，柱压又开始调动了，最大压和最小压差别1MPa,真不明白是柱子的问题还是机器问题，开始好好的，说变就变了

一般用缓冲液做流动相，平衡时间都比较长，建议开始平衡一端时间后进空样看看，如果感觉好了，再进样品。另外用缓冲液做流动相，压力一般是会逐渐变大的，但是不应该这么明显，你换个好点的柱子再试试。
另外注意温度的影响。
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醉时.错把路灯当月亮╰.
5楼2009-12-14 16:45:16
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nyj1116

金虫 (小有名气)

未来精英
引用回帖:
Originally posted by ynnbian at 2009-12-14 16:38:
是采用的梯度洗脱吗，一般在梯度变化时都会出现这种情况。

我是等度的洗脱，做药物分析的含量测定
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爱问问题的小蜜蜂
6楼2009-12-14 17:26:06
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nyj1116

金虫 (小有名气)

未来精英
引用回帖:
Originally posted by sdlj82 at 2009-12-14 16:45:

一般用缓冲液做流动相，平衡时间都比较长，建议开始平衡一端时间后进空样看看，如果感觉好了，再进样品。另外用缓冲液做流动相，压力一般是会逐渐变大的，但是不应该这么明显，你换个好点的柱子再试试。
另外注 ...

柱子换过了，还是那样，看来这机器不接受我的缓冲液啊，真郁闷
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爱问问题的小蜜蜂
7楼2009-12-14 17:29:12
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shzh0110

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
是不是有气泡了啊，还是有什么地方堵塞了！
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8楼2009-12-14 21:12:08
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chenjiajiang198

至尊木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
karl2100(金币+1,VIP+0):多谢指教！ 12-14 22:39
如果是用含盐的流动相，打比方说是磷酸盐水溶液-乙腈（30-70），在最初平衡柱子的时候，就应该先用水-乙腈（30-70），等压力稳定一段时间后再换成磷酸盐水溶液-乙腈（30-70），那样对柱子比较好。反正一开始冲柱子不要用盐的。
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9楼2009-12-14 21:19:20
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蒙面礼服侠

木虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
karl2100(金币+1,VIP+0):3Q 12-14 22:39
压力不稳定，常见原因是有气泡，也可能是管路赌住了
确保流动相脱气完全，再分段确定是哪段出问题
PS：觉得有些奇怪，既然流动相是缓冲盐和乙腈，为什么是用甲醇和水洗柱子呢？一般流动相是乙腈的话，就用乙腈冲洗和保存柱子，流动相是甲醇，就用甲醇冲洗和保留柱子。
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10楼2009-12-14 22:09:46
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