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nyj1116

金虫 (小有名气)

未来精英

[交流] 【求助】为什么我用磷酸盐缓冲液做流动相时柱压就不稳呢?

开始用甲醇和水冲柱子还是很好的,用磷酸盐缓冲液和乙腈作流动相时进了三针后,柱压又开始调动了,最大压和最小压差别1MPa,真不明白是柱子的问题还是机器问题,开始好好的,说变就变了
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爱问问题的小蜜蜂
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xjc1985

木虫 (小有名气)

沙发沙发
2楼2009-12-14 16:16:29
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ronaldoli198311

至尊木虫 (正式写手)

也有可能是流动相替换不完全的问题,柱压不稳应该是仪器的原因
3楼2009-12-14 16:34:30
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ynnbian

铁杆木虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
是采用的梯度洗脱吗,一般在梯度变化时都会出现这种情况。
淡泊,宁静。
4楼2009-12-14 16:38:15
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sdlj82

金虫 (正式写手)

每年都拖平均工资的后腿

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢指点! 12-14 22:38
引用回帖:
Originally posted by nyj1116 at 2009-12-14 15:54:
开始用甲醇和水冲柱子还是很好的,用磷酸盐缓冲液和乙腈作流动相时进了三针后,柱压又开始调动了,最大压和最小压差别1MPa,真不明白是柱子的问题还是机器问题,开始好好的,说变就变了

一般用缓冲液做流动相,平衡时间都比较长,建议开始平衡一端时间后进空样看看,如果感觉好了,再进样品。另外用缓冲液做流动相,压力一般是会逐渐变大的,但是不应该这么明显,你换个好点的柱子再试试。
另外注意温度的影响。
醉时.错把路灯当月亮╰.
5楼2009-12-14 16:45:16
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nyj1116

金虫 (小有名气)

未来精英

引用回帖:
Originally posted by ynnbian at 2009-12-14 16:38:
是采用的梯度洗脱吗,一般在梯度变化时都会出现这种情况。

我是等度的洗脱,做药物分析的含量测定
爱问问题的小蜜蜂
6楼2009-12-14 17:26:06
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nyj1116

金虫 (小有名气)

未来精英

引用回帖:
Originally posted by sdlj82 at 2009-12-14 16:45:

一般用缓冲液做流动相,平衡时间都比较长,建议开始平衡一端时间后进空样看看,如果感觉好了,再进样品。另外用缓冲液做流动相,压力一般是会逐渐变大的,但是不应该这么明显,你换个好点的柱子再试试。
另外注 ...

柱子换过了,还是那样,看来这机器不接受我的缓冲液啊,真郁闷
爱问问题的小蜜蜂
7楼2009-12-14 17:29:12
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shzh0110

新虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
是不是有气泡了啊,还是有什么地方堵塞了!
8楼2009-12-14 21:12:08
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chenjiajiang198

至尊木虫 (著名写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
karl2100(金币+1,VIP+0):多谢指教! 12-14 22:39
如果是用含盐的流动相,打比方说是磷酸盐水溶液-乙腈(30-70),在最初平衡柱子的时候,就应该先用水-乙腈(30-70),等压力稳定一段时间后再换成磷酸盐水溶液-乙腈(30-70),那样对柱子比较好。反正一开始冲柱子不要用盐的。
9楼2009-12-14 21:19:20
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蒙面礼服侠

木虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
karl2100(金币+1,VIP+0):3Q 12-14 22:39
压力不稳定,常见原因是有气泡,也可能是管路赌住了
确保流动相脱气完全,再分段确定是哪段出问题
PS:觉得有些奇怪,既然流动相是缓冲盐和乙腈,为什么是用甲醇和水洗柱子呢?一般流动相是乙腈的话,就用乙腈冲洗和保存柱子,流动相是甲醇,就用甲醇冲洗和保留柱子。
10楼2009-12-14 22:09:46
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