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leon198418029金虫 (小有名气)
research associate
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[交流]
【求助/交流】引物问题
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问问虫友们,我所订购的PCR套装要求引物浓度是20uM,如果我把引物稀释到10uM使用,会不会严重影响实验结果?另外,PCR退火温度一般在54℃吧?但是我的引物Tm值本身已偏小,在55℃左右,那么按照退火温度要比最小Tm还要小5℃的原则,我能不能将退火温度设定在50度呢?时间又该是多长呢? 有没有达人,能给份关于PCR的比较详细的步骤和注意事项清单,心得体会为主的。多谢啦! |
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yzhang1986
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