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leon198418029金虫 (小有名气)
research associate
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[交流]
【求助/交流】引物问题
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问问虫友们，我所订购的PCR套装要求引物浓度是20uM，如果我把引物稀释到10uM使用，会不会严重影响实验结果？另外，PCR退火温度一般在54℃吧？但是我的引物Tm值本身已偏小，在55℃左右，那么按照退火温度要比最小Tm还要小5℃的原则，我能不能将退火温度设定在50度呢？时间又该是多长呢？ 有没有达人，能给份关于PCR的比较详细的步骤和注意事项清单，心得体会为主的。多谢啦！  |
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yzhang1986
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