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南方科技大学公共卫生及应急管理学院2026级博士研究生招生报考通知(长期有效)
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刘仕博

金虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】被 real time-PCR折磨的孩子又来提问~

不好意思又来麻烦大家,不过还是厚着脸皮发个小贴~
最近我买了新的引物。像之前哪位高手建议过的,我先做了次PCR,觉得引物没有问题,就直接用real time-PCR做了primer test。
什么都可以就是扩增效率不够,在70-80%。引物的Tm值在64度左右,所以我设置的退火温度是58度。
如果想提高扩增效率我该怎么做呢?增加模板的浓度?改变退火温度?
感激不尽!
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生命在于折腾~
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地图蜗牛

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
有没有调整引物浓度?50-500(还有人建议50-900)uM,相互两两组合。

温度的问题,象前面一位虫友说的,适合你的才是正确的。
18楼2009-12-14 12:04:22
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