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cchang2010

金虫 (正式写手)

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[交流] 【求助】梯度洗脱梯度变化太大会出现很多杂峰吗？已有6人参与

时间\min 水乙腈三氟乙酸
0 90 10 0.1
13 10 90 0.1
21 10 90 0.1
按照上面的洗脱条件，走一针空针就有好多杂峰，出峰时间为11min至15min，柱温为25度，流速1.0ml/min，请问各位这是怎么回事？是梯度洗脱的梯度大了吗？
还是什么别的原因，谢谢各位了！

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将化学进行到底

1楼2009-12-08 20:51:56

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

lzh1220

铜虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
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专业: 药剂学

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
happy169(金币+2):谢谢参与，欢迎常来分析版 2010-04-13 09:14

引用回帖:

Originally posted by cchang2010 at 2009-12-08 20:51:56:
时间\min 水乙腈三氟乙酸
0 90 10 0.1
13 10 90 0.1
21 10 90 0.1
按照上面的洗脱条件，走一针空针就有好多杂峰，出峰时间为11min至15min，柱温为25度，流速1.0ml/min，请问各位这是怎么回事？是梯度洗脱的 ...

问题可能原因：
1.梯度太陡了，本人做过水-乙腈乙腈10到95，30分钟，基线还可以的。你那2000的峰形是否很难看，不规则，如果这样，应该可以肯定是梯度太陡，另外你的检测波长应该注意，因为三氟乙酸有紫外吸收，波长应避免末端吸收。
2.可能柱子不干净，充分冲过之后再进样。因为出杂峰时间在高乙腈比例段，因此不排除柱子污染的可能。