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davidck

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】关于细胞内信号分子的作用方式

大家说说细胞内信号分子的作用方式吧...
我现在做的是原核生物,以枯草芽孢杆菌为模式生物,在做一些关于细胞内的一些小的关于biofilm形成的signal,及其pathway

前面一个毕业生的课题中指出一个蛋白,具有两种调控方式,一个方式是作为激酶,另一个方式未明,也就是我现在做的方向。
问题是,他指出具有另一个调控功能的区域大概只有20个氨基酸,而且是固定在膜上,大家觉得有可能通过什么方式在起作用呢?

我现在做pull down,希望能发现一些能与之结合的蛋白,但是感觉希望好小,同时老板也在让我做一些有可能与之作用的downstream的信号蛋白的突变体,来碰,看是不是通过其来发生作用,这种方式也很盲目啊...

大家有什么好的想法没有,关键我是觉得这个功能域太小了,才20个AA,而且是固定在膜上的,能怎样的发生作用啊,唉~~~~~~~
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叔扬

新虫 (初入文坛)

★ ★ ★
davidck(金币+3,VIP+0):谢啦,这可能是一个方面,另一方面,我们想做的是想知道关于这个小尾巴的和分泌蛋白无关的功能。。 12-18 04:17
引用回帖:
Originally posted by davidck at 2009-12-12 07:47:
楼上兄台的建议令我收益良多啊,谢谢先

不过,可能是我没有把问题说清楚,我再说具体点,希望还能得到些帮助:
我的目的蛋白是typeI signal peptidase,其这个方面的功能已经研究的很清楚了,其功能域在胞外的 ...

原来不是激酶。
我觉得你说的“小尾巴”有两种可能功能。
第一种:信号肽酶的跨膜区域嵌在膜里,如果没有某种固定机制,就会随着细胞膜的运动而到处漂流,而不能在适当的地点发挥作用。那个小尾巴可能将信号肽酶固定到一个特定区域,这个区域汇集了核糖体以及分泌蛋白转运元件。小尾巴也可能直接和核糖体互作,把它牵引过来,以使得分泌蛋白能在这个区域表达。
第二种:小尾巴是直接和分泌蛋白作用的,只有当小尾巴和分泌蛋白前体结合,将其拉进到信号肽酶,才能够将其信号肽切除,将分泌蛋白释放。分泌蛋白正确地被释放,就有效地参与到胞外生物膜的合成当中去。

这样的Pull-down应该比较好做。甚至你不妨自己表达一些潜在的互作蛋白(核糖体、分泌蛋白、信号肽、分泌蛋白转运相关蛋白)来验证。

[ Last edited by 叔扬 on 2009-12-14 at 10:01 ]
小子无识
7楼2009-12-14 09:55:55
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qiang84zhang

银虫 (正式写手)

★ ★
1949stone(金币+2,VIP+0):谢谢交流 12-8 10:55
我在做你的前期工作,后面也要做,但具体的怎么去做,还在查文献阶段,以后多交流!我的QQ:17295080
我也比较关注革兰氏阳性菌biofilm的形成因素!希望可以多交流下!
2楼2009-12-08 09:30:08
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davidck

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by qiang84zhang at 2009-12-8 09:30:
我在做你的前期工作,后面也要做,但具体的怎么去做,还在查文献阶段,以后多交流!我的QQ:17295080
我也比较关注革兰氏阳性菌biofilm的形成因素!希望可以多交流下!

请问楼上的兄弟,你现在在哪搞这个?
3楼2009-12-10 08:44:59
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davidck

金虫 (正式写手)

是不是嫌弃金币太少了?
有朋友有建设性建议的话,可以多要求嘛,只要我有,我就给撒。。
4楼2009-12-11 07:20:46
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