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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】一个研究基因功能的实验题
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spiderboy

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】一个研究基因功能的实验题

假如某个哺乳动物基因可能编码了脂肪酸酶，如何在酵母细胞中设计实验研究该 基因的功能？
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1楼 2009-12-06 20:55:06
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tianpingpe

新虫 (小有名气)
★
spiderboy(金币+1,VIP+0):thanks 12-7 21:00
你是要克隆酵母中的这个基因，还是在酵母中表达这个基因？
如果你是要在酵母中表达这个基因的话，先从合成或者是克隆这个脂肪酸酶基因，然后添加合适的酶切位点，构建酵母的表达载体，然后转入酵母，表达，然后看能否得到纯的有活性的蛋白，然后做些酶学方面的实验，就可以研究他的功能。
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3楼2009-12-06 22:31:26
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qingxiong

木虫 (正式写手)
是不是将这个基因转入酵母中让其表达该蛋白哦
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2楼2009-12-06 21:07:55
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vivihao

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
spiderboy(金币+3,VIP+0):谢谢。。。。后来翻书的时候也想到了，，是应该这样 12-7 21:01
在酵母中可以用同源重组敲掉这个基因或者筛选该基因突变株，看看其生化生理变化，然后再把这个基因重新转进酵母中，看看有没有弥补这种变化，这样就能很好的验证此基因的功能了。这样做的比较深入，IF肯定也高点。
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4楼2009-12-07 12:05:54
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bbyu007

木虫 (正式写手)
★
spiderboy(金币+1,VIP+0):谢谢 12-7 21:04
既然想到了用yeast，那么首先可以查一下有关脂肪酸酶互作蛋白的文献资料，将你的可能的脂肪酸酶cDNA与其已知的互作蛋白共转酵母，研究其相互作用，是对其功能的很好研究啊！
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我是笨笨鱼~~~
5楼2009-12-07 12:28:50
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