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spiderboy

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】一个研究基因功能的实验题

假如某个哺乳动物基因可能编码了脂肪酸酶,如何在酵母细胞中设计实验研究该 基因的功能?
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qingxiong

木虫 (正式写手)

是不是将这个基因转入酵母中让其表达该蛋白哦
2楼2009-12-06 21:07:55
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tianpingpe

新虫 (小有名气)


spiderboy(金币+1,VIP+0):thanks 12-7 21:00
你是要克隆酵母中的这个基因,还是在酵母中表达这个基因?
如果你是要在酵母中表达这个基因的话,先从合成或者是克隆这个脂肪酸酶基因,然后添加合适的酶切位点,构建酵母的表达载体,然后转入酵母,表达,然后看能否得到纯的有活性的蛋白,然后做些酶学方面的实验,就可以研究他的功能。
3楼2009-12-06 22:31:26
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vivihao

金虫 (小有名气)

★ ★ ★
spiderboy(金币+3,VIP+0):谢谢。。。。后来翻书的时候也想到了,,是应该这样 12-7 21:01
在酵母中可以用同源重组敲掉这个基因或者筛选该基因突变株,看看其生化生理变化,然后再把这个基因重新转进酵母中,看看有没有弥补这种变化,这样就能很好的验证此基因的功能了。这样做的比较深入,IF肯定也高点。
4楼2009-12-07 12:05:54
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bbyu007

木虫 (正式写手)


spiderboy(金币+1,VIP+0):谢谢 12-7 21:04
既然想到了用yeast,那么首先可以查一下有关脂肪酸酶互作蛋白的文献资料,将你的可能的脂肪酸酶cDNA与其已知的互作蛋白共转酵母,研究其相互作用,是对其功能的很好研究啊!
我是笨笨鱼~~~
5楼2009-12-07 12:28:50
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