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【求助/交流】双酶切连接问题
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spiderboy
金虫
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注册: 2007-11-21
专业: 生物化学
再重做一次试试。。。你可以尝试连接十个小时后再加点酶,再连十个小时
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11楼
2009-12-07 21:12:58
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漫迹
金虫
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专业: 生物大分子结构与功能
引用回帖:
Originally posted by
changes
at 2009-12-7 11:48:
可能是载体没切好,分步酶切试试。沉淀回收也可。
双酶切后电泳条带的位置都正确,应该 没问题的,但沉淀回收怎么做呢
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12楼
2009-12-08 16:19:42
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cavafory
铁虫
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虫号: 511449
注册: 2008-02-25
专业: 病毒学
★
小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖交流
双酶切以后不能用沉淀的方法回收,因为里面有你要的也有你不要的片段啊,先做凝胶电泳,注意浓度,然后用试剂盒回收,回收效率没有试剂盒上面说的那么高,所以你做酶切的时候体系大点多切点质粒。如果你没有试剂盒最好用低熔点的琼脂糖,利于后面的连接实验
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13楼
2009-12-30 11:31:46
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