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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】双酶切连接问题
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spiderboy

金虫 (正式写手)
再重做一次试试。。。你可以尝试连接十个小时后再加点酶，再连十个小时
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11楼2009-12-07 21:12:58
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漫迹

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by changes at 2009-12-7 11:48:
可能是载体没切好，分步酶切试试。沉淀回收也可。

双酶切后电泳条带的位置都正确，应该 没问题的，但沉淀回收怎么做呢
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12楼2009-12-08 16:19:42
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cavafory

铁虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
双酶切以后不能用沉淀的方法回收，因为里面有你要的也有你不要的片段啊，先做凝胶电泳，注意浓度，然后用试剂盒回收，回收效率没有试剂盒上面说的那么高，所以你做酶切的时候体系大点多切点质粒。如果你没有试剂盒最好用低熔点的琼脂糖，利于后面的连接实验
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13楼2009-12-30 11:31:46
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