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815kathy

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】请教经典的碱裂解法提取细菌基因组DNA

如题,目前在做细菌的基因组DNA提取,可是氯仿异戊醇抽提完后再加入异丙醇会出现大量沉淀,而且加入TE都不溶。。。。现在想用经典的碱裂解法提一次,有没有高人知道啊,谢谢
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qqsvery

木虫 (著名写手)


司马诸葛(金币+1,VIP+0): 12-6 09:59
你用氯仿异戊醇抽提后怎么还要加入异丙醇?你没用苯酚吗?
谎言和真实在河边洗澡,谎言先洗好,穿走了真实的衣服,真实却不肯穿谎言的衣服。后来人们眼里只有穿着真实衣服的谎言,却很难接受赤裸裸的真实。
2楼2009-12-06 09:56:16
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steven689

木虫 (著名写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+2,VIP+0): 12-6 11:34
碱裂解法提取 基因组DNA????
SDS裂解吗?没加氢氧化钠吧?裂解液pH值多少?太高DNA会变性。

另外最后加入 蛋白酶K 消化一下 DNA结合蛋白,你的样品不溶,是不是很白呀,
说明有蛋白质和多糖
3楼2009-12-06 10:09:16
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free-fish

铜虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
还是用试剂盒吧,比较省事,方便
4楼2009-12-06 11:01:00
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yeyw04

新虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
经典是用酚氯仿法提取基因组DNA,碱裂解是提取质粒的。还是用试剂盒提取很干净,但是量不会太大。
5楼2009-12-25 20:52:27
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fighter09

木虫 (小有名气)

试剂盒方便快捷。用经典的方法的话可以参考分子克隆实验指南,小木虫上有电子版的,介绍的很详细
6楼2009-12-26 21:10:34
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