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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】请教经典的碱裂解法提取细菌基因组DNA
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815kathy

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】请教经典的碱裂解法提取细菌基因组DNA

如题，目前在做细菌的基因组DNA提取，可是氯仿异戊醇抽提完后再加入异丙醇会出现大量沉淀，而且加入TE都不溶。。。。现在想用经典的碱裂解法提一次，有没有高人知道啊，谢谢
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1楼 2009-12-05 21:56:28
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qqsvery

木虫 (著名写手)
★
司马诸葛(金币+1,VIP+0): 12-6 09:59
你用氯仿异戊醇抽提后怎么还要加入异丙醇？你没用苯酚吗？
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谎言和真实在河边洗澡，谎言先洗好，穿走了真实的衣服，真实却不肯穿谎言的衣服。后来人们眼里只有穿着真实衣服的谎言，却很难接受赤裸裸的真实。
2楼2009-12-06 09:56:16
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steven689

木虫 (著名写手)
★ ★ ★
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amisking(金币+2,VIP+0): 12-6 11:34
碱裂解法提取 基因组DNA????
SDS裂解吗？没加氢氧化钠吧？裂解液pH值多少？太高DNA会变性。

另外最后加入 蛋白酶K 消化一下 DNA结合蛋白，你的样品不溶，是不是很白呀，
说明有蛋白质和多糖
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3楼2009-12-06 10:09:16
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free-fish

铜虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
还是用试剂盒吧，比较省事，方便
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4楼2009-12-06 11:01:00
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yeyw04

新虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
经典是用酚氯仿法提取基因组DNA，碱裂解是提取质粒的。还是用试剂盒提取很干净，但是量不会太大。
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5楼2009-12-25 20:52:27
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fighter09

木虫 (小有名气)
试剂盒方便快捷。用经典的方法的话可以参考分子克隆实验指南，小木虫上有电子版的，介绍的很详细
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6楼2009-12-26 21:10:34
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