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dcb005金虫 (著名写手)
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[交流]
pBI 121载体 GUS表达问题
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最近打算构建gene+pbi121 的重组子，想表达121载体里的GUS基因，我的片段插入在35s和121载体中间，那么我片段的基因终止密码子需要修改么？若不修改翻译就结束了？若需要修改的话，那么表达出来的蛋白还是自己需要的蛋白序列么？ 请高手帮忙？ [ Last edited by amisking on 2009-12-5 at 10:53 ] |
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dcb005
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5楼2009-12-07 13:10:25
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楼主是想构建一个目的基因与GUS一起的融合蛋白吗？如果是这样就要设计引物删掉原来基因的终止密码子否则下面的GUS基因无法被转录。 但是我从来没见过有人做GUS融合蛋白的，GUS太大了，可能会干扰你本身蛋白的定位和特性，为什么不用GFP类的荧光蛋白呢？ GUS更多的还是用来检测组织表达模式吧？拿你基因的启动子替换掉原载体上的35S，然后转基因看看你的基因在什么时期什么组织里面表达。 印象中PBI载体要用卡纳来筛选，先提醒楼主，筛起来比潮霉素难很多。 |
2楼2009-12-05 10:23:22
dyyyyy
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4楼2009-12-06 13:42:05
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