24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 780  |  回复: 4
当前主题已经存档。

7606

金虫 (初入文坛)

[交流] 求助DNA杂交实验方法?

我现在在做DNA实验,想将两条DNA链进行杂交,不知道该如何操作?
  我的DNA链序列为5′-ACCTGGGGGAGTATTGCGGAGGAAGGT-3′ ,
其互补链序列是:5′-ACCTTCCTCCGCAATACTCCCCCAGGT-3′,
已经知道它们的Tm(1MNa+)80.8,Tm(50mMNa+)=59.2,
请教要在怎样的条件下(如缓冲溶液,离子强度介质、温度时间等条件)才能将这两条链杂交?具体是怎么操作呢?

本人是外行,从没有做过DNA方面的实验,请教各位朋友,希望大家能帮帮忙!

[ Last edited by amisking on 2009-12-4 at 20:07 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hbwang6391

木虫 (著名写手)

忽忽家族觉糖主


7606(金币+1,VIP+0):什么质粒 啊? 12-6 18:39
质粒?
笑笑别人,让别人笑笑,笑笑自己
2楼2009-12-04 19:48:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fuhui1108

木虫 (正式写手)

小害虫


7606(金币+1,VIP+0):什么是质粒方法、鸟枪方法啊? 12-6 18:39
质粒是一种方法,要一定的技术含量
还有就是用鸟枪法但是成功率很低,要有耐性作哦!
小害虫
3楼2009-12-04 20:09:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mever

木虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★
7606(金币+5,VIP+0):谢谢!我先试一试! 12-6 18:40
只是两条单链DNA杂交形成双链的话
不用特殊的缓冲液
用水分别溶解两条单链
混合溶液 在沸水中加热10min
缓慢冷却到室温
就行了
4楼2009-12-04 20:45:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qingfengwu

金虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★
7606(金币+5,VIP+0):谢谢!我先试一试! 12-6 18:40
(1)把DNA 单链溶解于 10mM Tris, 1mM EDTA, 50 mM NaCl (pH=8.0) 溶液中。
(2)1:1混合两条互补单链。
(3)95度加热5min, 然后放到常温下,让它自然冷却,等完全冷却到室温,就可以形成互补双链了。
5楼2009-12-05 00:18:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 7606 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 面上本子正文33页,违规吗?会被低分嘛? +14 1234567wang 2026-05-17 16/800 2026-05-21 17:58 by 脆脆的饼干
[基金申请] 国自然评分 +4 无名者登山 2026-05-20 5/250 2026-05-21 16:35 by swuq
[基金申请] 国自然上会要求 +7 无名者登山 2026-05-18 11/550 2026-05-21 15:50 by draco1987
[论文投稿] 投稿求助,期刊 +4 希冀,有书读 2026-05-20 6/300 2026-05-21 15:09 by 982564
[基金申请] 提交了我也来说说感想 +9 fummck 2026-05-20 10/500 2026-05-21 14:17 by draco1987
[基金申请] 评审有感 +15 popular289 2026-05-18 26/1300 2026-05-21 10:35 by 西葫芦炒鸡蛋
[基金申请] 今年审到国自然15份,谈谈感受 +21 国自然国社科中 2026-05-17 22/1100 2026-05-21 09:37 by 2000zf36392
[基金申请] 河北省自然科学基金 +4 Peterchao 2026-05-18 4/200 2026-05-21 08:17 by articlefan
[论文投稿] 投MDPI的三个期刊都被桌拒 +3 木虫研究牲 2026-05-17 4/200 2026-05-21 08:02 by bobvan
[文学芳草园] 献血感触 +7 呀呀好傻 2026-05-19 12/600 2026-05-21 07:08 by maolC
[考博] 云南大学材料与能源学院解琳课题组钙钛矿博士招生 +4 光伏爱好者 2026-05-17 6/300 2026-05-21 01:37 by 17520222914
[有机交流] 反应很差,大量原料没有反应 5+3 Mr.Zot 2026-05-19 8/400 2026-05-20 22:19 by Equinoxhua
[考博] 如果工作了想读博,可以边工作边读全日制嘛? 30+3 铁达火车 2026-05-18 5/250 2026-05-20 09:33 by tfang
[有机交流] 如何实现卤原子转化 +3 BT20230424 2026-05-15 8/400 2026-05-20 09:32 by xtlilibin
[教师之家] 上海大学实验技术岗位非升即走 +12 嘻嘻哈哈乐呵呵 2026-05-15 13/650 2026-05-20 08:34 by xli1984
[考博] 找博士生导师 +6 小代想上岸 2026-05-15 7/350 2026-05-19 10:22 by free_fisher
[考博] 2026博士还有哪些学校有名额 +7 小王求读研 2026-05-15 8/400 2026-05-19 08:27 by zhyzzh
[考博] 博士申请 +5 星…… 2026-05-18 6/300 2026-05-18 23:49 by 糊糊涂涂好
[硕博家园] 我在等一个没有答案的答案 +3 Love_MH 2026-05-17 3/150 2026-05-18 02:22 by 竹林孤影
[考博] 光量子物理方向 博士招生 1人(2026.09) +3 sandyworld 2026-05-15 4/200 2026-05-17 14:38 by sandyworld
信息提示
请填处理意见