24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 516  |  回复: 7
当前主题已经存档。

kuuikaifeng

[交流] 求助:质粒酶切相关问题!!

请教大家一个问题,我问同学要了个1301的质粒,用BglII 和EcoRI切出4条带来,本来应该两条带。而且我可以保证酶切是完全的。可同学说他给我的质粒没问题,前几天他用还是好的。高手给解决一下吧

[ Last edited by amisking on 2009-12-3 at 22:32 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)

★ ★
kuuikaifeng(金币+1):谢谢参与
amisking(金币+1,VIP+0): 12-3 22:32
原始质粒或者构建好的质粒上有4个酶切位点吧,或者切的不好,酶出现了星号活性
2楼2009-12-03 21:15:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

竹子2225

银虫 (小有名气)

★ ★ ★
kuuikaifeng(金币+1):谢谢参与
amisking(金币+2,VIP+0): 12-3 22:32
有可能是酶切不完全吗,也就是没有完全切开的质粒的带  切开的含有目的基因的质粒带  还有就是部分双酶切的目的基因和去基因质粒的带....但我不确定会不会这样...
3楼2009-12-03 21:34:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

smurfen

至尊木虫 (著名写手)


kuuikaifeng(金币+1):谢谢参与
哪个公司的酶哦
换个试试吧
Advances in Prevention of Thermal Runaway in Lithium-Ion Batteries
4楼2009-12-03 21:46:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhubingbao

木虫 (小有名气)

默默向前

可能是酶切不完全
5楼2009-12-03 23:39:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyong1981

金虫 (正式写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
酶切不完全,基本可以这样确定,下次你把质粒量减少,酶切时间延长,看看,再有,给你个trick,37°酶切完后,你放在65°5分钟,然后马上放冰上,最后加loading buffer,跑胶的效果非常好 ,成图效果是很完美的,咱做实验就是要追求完美~
6楼2009-12-04 09:55:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyong1981

金虫 (正式写手)


道理大家都懂,我就不说了。希望你试验成功
7楼2009-12-04 09:56:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

leannele

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我认为酶切的体系和时间很重要。建议准确测量质粒的浓度,根据说明书来确定反应体系。
8楼2009-12-12 21:55:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 kuuikaifeng 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 312求调剂 +6 李鸿飞飞 2026-04-06 6/300 2026-04-12 00:34 by 蓝云思雨
[考研] 22408调剂315分 +3 zhuangyan123 2026-04-09 3/150 2026-04-12 00:25 by 蓝云思雨
[考研] 化工调剂求导师收留!一志愿失利,踏实肯干,有植物提取科研经历 +20 yzyzx 2026-04-09 21/1050 2026-04-12 00:12 by 小小小小啦啦啦
[考研] 344 材料专业 求调剂211 无地域要求 +5 hualkop 2026-04-11 5/250 2026-04-11 23:13 by 852137818
[考研] 调剂 +10 只叙离别辞 2026-04-09 12/600 2026-04-11 20:57 by 逆水乘风
[考研] 283求调剂 086004考英二数二 +17 那个噜子 2026-04-10 18/900 2026-04-11 16:27 by 明月此时有
[考研] 求调剂,一志愿大连理工大学354分 +5 雨声余生 2026-04-11 6/300 2026-04-11 16:12 by 雨声余生
[考研] 生物学调剂 +8 小冉要努力 2026-04-10 9/450 2026-04-11 10:22 by wwj2530616
[考研] 复试调剂 +9 积极向上; 2026-04-10 11/550 2026-04-11 09:25 by 猪会飞
[考研] 一志愿211,化学310分,本科重点双非,求调剂 +23 努力奋斗112 2026-04-08 23/1150 2026-04-10 23:29 by 314126402
[考研] 一志愿矿大,材料工程专硕314分,0856可调都可以 +15 无懈可击的巨人 2026-04-09 15/750 2026-04-10 18:10 by hmn_wj
[硕博家园] 0856材料化工求调剂,一志愿211,初试成绩349 +5 江淮北月 2026-04-05 5/250 2026-04-10 16:26 by 高维春
[考研] 机械还有还有名额吗?太难了 +6 笑笑袁 2026-04-10 6/300 2026-04-10 11:54 by 高维春
[考研] 0702物理学学硕299求调剂 +6 祁柒连 2026-04-06 6/300 2026-04-10 11:10 by Roomoo
[考研] 301求调剂 +6 静静想想 2026-04-05 6/300 2026-04-10 09:15 by Delta2012
[考研] 一志愿华东理工085601材料工程303分求调剂 +15 a1708 2026-04-06 15/750 2026-04-08 16:23 by luoyongfeng
[考研] 265求调剂 +19 小木虫085600 2026-04-06 21/1050 2026-04-08 10:38 by 逆水乘风
[考研] 344求调剂 +11 魏子per 2026-04-07 11/550 2026-04-07 23:01 by JourneyLucky
[考研] 085602调剂 初试总分335 +10 19123253302 2026-04-05 10/500 2026-04-07 15:23 by 小乔同学ya
[考研] 22408 318分求调剂 +4 勤奋的小笼包 2026-04-06 6/300 2026-04-07 15:05 by 纸鹤555
信息提示
请填处理意见