24小时热门版块排行榜    

查看: 651  |  回复: 7
当前主题已经存档。

kuuikaifeng

[交流] 求助:质粒酶切相关问题!!

请教大家一个问题,我问同学要了个1301的质粒,用BglII 和EcoRI切出4条带来,本来应该两条带。而且我可以保证酶切是完全的。可同学说他给我的质粒没问题,前几天他用还是好的。高手给解决一下吧

[ Last edited by amisking on 2009-12-3 at 22:32 ]
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)

★ ★
kuuikaifeng(金币+1):谢谢参与
amisking(金币+1,VIP+0): 12-3 22:32
原始质粒或者构建好的质粒上有4个酶切位点吧,或者切的不好,酶出现了星号活性
2楼2009-12-03 21:15:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

竹子2225

银虫 (小有名气)

★ ★ ★
kuuikaifeng(金币+1):谢谢参与
amisking(金币+2,VIP+0): 12-3 22:32
有可能是酶切不完全吗,也就是没有完全切开的质粒的带  切开的含有目的基因的质粒带  还有就是部分双酶切的目的基因和去基因质粒的带....但我不确定会不会这样...
3楼2009-12-03 21:34:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

smurfen

至尊木虫 (著名写手)


kuuikaifeng(金币+1):谢谢参与
哪个公司的酶哦
换个试试吧
Advances in Prevention of Thermal Runaway in Lithium-Ion Batteries
4楼2009-12-03 21:46:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhubingbao

木虫 (小有名气)

默默向前

可能是酶切不完全
5楼2009-12-03 23:39:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyong1981

金虫 (正式写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
酶切不完全,基本可以这样确定,下次你把质粒量减少,酶切时间延长,看看,再有,给你个trick,37°酶切完后,你放在65°5分钟,然后马上放冰上,最后加loading buffer,跑胶的效果非常好 ,成图效果是很完美的,咱做实验就是要追求完美~
6楼2009-12-04 09:55:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyong1981

金虫 (正式写手)


道理大家都懂,我就不说了。希望你试验成功
7楼2009-12-04 09:56:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

leannele

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我认为酶切的体系和时间很重要。建议准确测量质粒的浓度,根据说明书来确定反应体系。
8楼2009-12-12 21:55:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 kuuikaifeng 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +9 majunge000 2026-08-10 12/600 2026-08-13 23:20 by iwuli
[考博] 澳大利亚 Murdoch University 全奖博士招生(3个名额)地质化工冶金领域 +36 AI8RaGaPaSCR 2026-08-07 38/1900 2026-08-13 23:15 by 633CJY576Q1h
[文学芳草园] 阿姨 +4 汪汪锅 2026-08-09 4/200 2026-08-13 19:43 by arzu_hma
[硕博家园] 一作与独作在应聘高校教师时区别大吗 +3 mbygzh 2026-08-08 4/200 2026-08-13 19:31 by 龙-樱
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 28/1400 2026-08-13 17:51 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +14 documentary 2026-08-10 16/800 2026-08-13 16:39 by 润生71
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +9 家与远方 2026-08-10 14/700 2026-08-13 09:41 by 臭臭不臭01
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +22 Lanmanbaby 2026-08-09 36/1800 2026-08-12 22:50 by sdfapple719
[论文投稿] 职称评审,求友友推荐见刊最快的期刊 +4 工厂打螺丝 2026-08-08 4/200 2026-08-12 09:18 by hansi2025
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +3 yuleib84 2026-08-11 3/150 2026-08-11 21:53 by jnhyjjm
[硕博家园] 读博的好处 +3 lnee 2026-08-11 3/150 2026-08-11 18:10 by 希望我好好的
[基金申请] 关于代码变化问题,想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于filecode,很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
信息提示
请填处理意见