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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【交流/求助】关于琼脂糖电泳的问题
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最爱花诗雨

金虫 (正式写手)

穷鬼

[交流] 【交流/求助】关于琼脂糖电泳的问题

本人将pTrc99a质粒电转到E.coli中，用amp的LB板培养，可以长出菌落，然后挑单菌落转点，最后用ECOR I和ECOR V进行酶切鉴定，结果电泳并没有出现条带

[ Last edited by amisking on 2009-12-11 at 22:47 ]
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严于律己，宽以待人
1楼 2009-12-03 20:12:48
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zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
挑单菌落转点是什么意思？抽出来的质粒浓度怎么样？
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2楼2009-12-03 21:20:29
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竹子2225

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
有可能是质粒的浓度太低，也可能是胶做的太薄，样品没有加进去...
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3楼2009-12-03 21:30:07
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hlp0226

木虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
建议先检测提取的质粒浓度及质量，然后再酶切检测
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4楼2009-12-04 09:01:34
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jinran

金虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我也觉得是不是质粒的质量，或不好转染没有做好
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5楼2009-12-04 09:13:38
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liyong1981

金虫 (正式写手)
感觉是质粒浓度太低了，多摇摇在提
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6楼2009-12-04 09:50:50
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zier1011

木虫 (著名写手)
在酶切之前，检验一下所提取的质粒的浓度
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花还香香的
7楼2009-12-04 10:58:42
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keyanhrc

新虫 (小有名气)
可能是假阳性菌落呢
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8楼2009-12-04 13:22:16
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tianhang

新虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
先做一下PCR鉴定一下，不然很有可能是假阳性。
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9楼2009-12-04 14:22:50
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最爱花诗雨

金虫 (正式写手)

穷鬼
引用回帖:
Originally posted by jinran at 2009-12-4 09:13:
我也觉得是不是质粒的质量，或不好转染没有做好

质粒浓度都是在100多，应该没什么问题吧
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严于律己，宽以待人
10楼2009-12-07 17:16:53
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