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最爱花诗雨

金虫 (正式写手)

穷鬼

[交流] 【交流/求助】关于琼脂糖电泳的问题

本人将pTrc99a质粒电转到E.coli中,用amp的LB板培养,可以长出菌落,然后挑单菌落转点,最后用ECOR I和ECOR V进行酶切鉴定,结果电泳并没有出现条带

[ Last edited by amisking on 2009-12-11 at 22:47 ]
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严于律己,宽以待人
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zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
挑单菌落转点是什么意思?抽出来的质粒浓度怎么样?
2楼2009-12-03 21:20:29
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竹子2225

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
有可能是质粒的浓度太低,也可能是胶做的太薄,样品没有加进去...
3楼2009-12-03 21:30:07
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hlp0226

木虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
建议先检测提取的质粒浓度及质量,然后再酶切检测
4楼2009-12-04 09:01:34
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jinran

金虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我也觉得是不是质粒的质量,或不好转染没有做好
5楼2009-12-04 09:13:38
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liyong1981

金虫 (正式写手)


感觉是质粒浓度太低了,多摇摇在提
6楼2009-12-04 09:50:50
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zier1011

木虫 (著名写手)

在酶切之前,检验一下所提取的质粒的浓度
花还香香的
7楼2009-12-04 10:58:42
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keyanhrc

新虫 (小有名气)

可能是假阳性菌落呢
8楼2009-12-04 13:22:16
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tianhang

新虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
先做一下PCR鉴定一下,不然很有可能是假阳性。
9楼2009-12-04 14:22:50
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最爱花诗雨

金虫 (正式写手)

穷鬼

引用回帖:
Originally posted by jinran at 2009-12-4 09:13:
我也觉得是不是质粒的质量,或不好转染没有做好

质粒浓度都是在100多,应该没什么问题吧
严于律己,宽以待人
10楼2009-12-07 17:16:53
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