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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 转化后长成一片，无单菌落
汕头大学海洋科学接受调剂
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xhlxhl

木虫 (正式写手)

[交流] 转化后长成一片，无单菌落

如题，T载体连接过夜转化，AMP抗性~~ 以前偶尔也出现过这种状况，但不知道什么原因，怎么站内无法上传图片呢

[ Last edited by xhlxhl on 2009-12-3 at 17:26 ]
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1楼 2009-12-03 17:09:57
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

humants

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
转化完成这后，离心浓缩之后少弃上清，涂布的时候去100微升或者更少，要不就干脆不离心浓缩，直接涂布。
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16楼2009-12-04 14:11:30
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普通回帖

qingfengwu

金虫 (小有名气)
★
1949stone(金币+1,VIP+0): 12-3 17:39
质粒加的太多了。少加一点就可以了。
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2楼2009-12-03 17:27:23
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zhaocy8903

木虫 (知名作家)
★
xhlxhl(金币+1,VIP+0):谢谢 12-3 23:45
AMP是否失效了
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3楼2009-12-03 18:17:31
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
amisking(金币+1,VIP+0): 12-3 22:33
Amp失效，或者涂太多了，或者说培养过度了
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4楼2009-12-03 18:21:48
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xhlxhl

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by qingfengwu at 2009-12-3 17:27:
质粒加的太多了。少加一点就可以了。

不是质粒，转的连接产物
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5楼2009-12-03 18:42:39
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goodwish

木虫 (正式写手)

木虫书呆子
★ ★ ★
amisking(金币+2,VIP+0): 12-3 22:33
xhlxhl(金币+1,VIP+0):可以试一下，谢谢 12-3 23:41
平板的问题，氨苄失效了。或是感受态细胞本身带有质粒。连接产物一般不会长那么多。可以挑个菌摇一下试试。
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生命的海洋里，我是蓝色的一滴
6楼2009-12-03 18:59:00
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zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★
amisking(金币+3,VIP+0): 12-3 22:33
xhlxhl(金币+1,VIP+0):3ks，应该是AMP失效 12-3 23:46
1、抗生素失效
2、转化效率较高，菌液涂布的较多
3、感受态细胞有问题，染了杂菌或者其他的问题
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7楼2009-12-03 21:24:11
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yzuxhq368

金虫 (小有名气)
平板太潮，涂板前放培养箱里烘1-2个小时
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8楼2009-12-03 21:44:56
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
这种小问题也拿出来问？做实验没有主动性，怎么做研究？
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
9楼2009-12-03 23:05:23
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shenye.judy

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
氨苄失效会这样，我也遇到过，用新配的就好了。
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10楼2009-12-04 09:40:23
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