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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 转化后长成一片，无单菌落
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liyong1981

金虫 (正式写手)
★
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转化过得，就不是质粒了么？笑话，作为载体，只是引入了你的外援片段而已，质粒的属性没变

可能原因：1，抗生素失效，倒置选择压降低
          2，涂平板的技术问题，不是菌液越多越好
          希望对你有所帮助。另：你用的是PMD18-T的载体吧，这个常用，基本不存在问题
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11楼2009-12-04 09:48:06
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zier1011

木虫 (著名写手)
★
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抗生素失效的可能性大些，
楼主菌液就算涂多，能涂多多少，太多了他根本涂不干，菌液还四处流呢，怎么倒置，除非楼主根本就不管这些，管他菌液涂的样，就无所谓的倒置培养，以至于菌液四流。
转化效率高到重组菌整板生长的情况，呵呵呵，应该很低吧，要真是那样，楼主该去偷着乐了
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花还香香的
12楼2009-12-04 10:57:07
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十比

木虫 (著名写手)
多半是氨苄失效了。
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13楼2009-12-04 12:22:05
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anik

银虫 (正式写手)
★
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只有8楼回答对了。我再补充一点，涂板时，涂均了就行，不要一直涂到完全吸收为止，虽然还有液体在培养基的表面，正面放置一个小时后再倒置培养。
涂布棒一直搅动会将其表面的那层膜划破，致使出现一片白，而看不到单菌落。
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14楼2009-12-04 13:10:39
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yangym1123

木虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
氨苄青霉素失效或者是感受态被污染。后者更有可能！
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15楼2009-12-04 13:47:12
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humants

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
转化完成这后，离心浓缩之后少弃上清，涂布的时候去100微升或者更少，要不就干脆不离心浓缩，直接涂布。
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16楼2009-12-04 14:11:30
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塞外雨

金虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
这个问题我们也经常遇到，很疑惑，尤其是电转的时候。
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只想找到关心我、在我犹豫时能给我判断的人
17楼2009-12-04 14:44:54
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