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liyong1981

金虫 (正式写手)



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转化过得,就不是质粒了么?笑话,作为载体,只是引入了你的外援片段而已,质粒的属性没变

可能原因:1,抗生素失效,倒置选择压降低
          2,涂平板的技术问题,不是菌液越多越好
          希望对你有所帮助。另:你用的是PMD18-T的载体吧,这个常用,基本不存在问题

11楼2009-12-04 09:48:06
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zier1011

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
抗生素失效的可能性大些,
楼主菌液就算涂多,能涂多多少,太多了他根本涂不干,菌液还四处流呢,怎么倒置,除非楼主根本就不管这些,管他菌液涂的样,就无所谓的倒置培养,以至于菌液四流。
转化效率高到重组菌整板生长的情况,呵呵呵,应该很低吧,要真是那样,楼主该去偷着乐了
花还香香的
12楼2009-12-04 10:57:07
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十比

木虫 (著名写手)

多半是氨苄失效了。
13楼2009-12-04 12:22:05
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anik

银虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
只有8楼回答对了。我再补充一点,涂板时,涂均了就行,不要一直涂到完全吸收为止,虽然还有液体在培养基的表面,正面放置一个小时后再倒置培养。
涂布棒一直搅动会将其表面的那层膜划破,致使出现一片白,而看不到单菌落。
14楼2009-12-04 13:10:39
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yangym1123

木虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
氨苄青霉素失效或者是感受态被污染。后者更有可能!
15楼2009-12-04 13:47:12
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humants

金虫 (正式写手)


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转化完成这后,离心浓缩之后少弃上清,涂布的时候去100微升或者更少,要不就干脆不离心浓缩,直接涂布。
16楼2009-12-04 14:11:30
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塞外雨

金虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
这个问题我们也经常遇到,很疑惑,尤其是电转的时候。
只想找到关心我、在我犹豫时能给我判断的人
17楼2009-12-04 14:44:54
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