应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » PCR高手请进，有问题求教，急！
71/1返回列表
查看: 600  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

陈思容

铜虫 (正式写手)

[交流] PCR高手请进，有问题求教，急！

师姐要做菌种鉴定，用真菌的通用引物ITS1、ITS4，P出来很诡异的结果：本来是在500-700之间出现单一的条带，可是在2000-1000之前出现了弥散状条带，TD-PCR，普通PCR的结果都是如此，实在没辙了，师姐很崩溃，我也很郁闷！条件、反应体系都是我帮她设的，经过前人的验证没有问题，师姐自己加的样，想不明白问题到底出在那个环节，还希望各位高手赐教！

本帖关键词：PCR 真菌 师姐 菌种 引物
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2009-12-03 10:29:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

陈思容

铜虫 (正式写手)
在线等，不要沉了
回复此楼
2楼2009-12-03 11:04:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
是不是基因组提的不好，里面还含有杂蛋白，导致出现弥散状条带？
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2009-12-03 11:30:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

陈思容

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by zhuifeng7000 at 2009-12-3 11:30:
是不是基因组提的不好，里面还含有杂蛋白，导致出现弥散状条带？

应该不是杂蛋白的问题，还有没有其他的可能？
赞一下 回复此楼
4楼2009-12-03 11:50:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

一只鱼ddtt

银虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+4,VIP+0): 12-3 22:35
你这个真菌是不是比较特殊，我最近细菌鉴定时也出现这样的问题，本该出现一条带，结果出现了意想不到的几条，体系和条件也是别人验证过的，后来做了细菌涂布纯化，发现该菌有三种不同的形态，但绝不是被污染了，老师说有可能是一个菌的多种形态，也可能是复合菌株，所以我建议你用普通的方法先鉴定一下你的菌，不行就切胶回收测序。
赞一下(21人) 回复此楼
做个有风度的人
5楼2009-12-03 14:48:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

陈思容

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 一只鱼ddtt at 2009-12-3 14:48:
你这个真菌是不是比较特殊，我最近细菌鉴定时也出现这样的问题，本该出现一条带，结果出现了意想不到的几条，体系和条件也是别人验证过的，后来做了细菌涂布纯化，发现该菌有三种不同的形态，但绝不是被污染了，老 ...

谢谢，P出来时一片弥散的条带，特异性不高，尝试加DMSO等增加特异性的东西吧
赞一下 回复此楼
6楼2009-12-03 16:50:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

陈思容

铜虫 (正式写手)
amisking(金币+0,VIP+0):恭喜，解除置顶！ 12-3 22:36
先在这里谢谢大家了，我们终于P出来了，56°退火温度，关键的是加入DMSO，这大概是增加了特异性吧，说不清楚，反正出来的条带很漂亮！再次谢谢大家
赞一下(20人) 回复此楼
7楼2009-12-03 19:32:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 陈思容 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 云南大学材料与能源学院解琳课题组钙钛矿博士招生 +4 光伏爱好者 2026-05-17 7/350 2026-05-24 10:20 by 光伏爱好者
[基金申请] 西安交大新媒学院副院长用撤稿论文结题 +3 bjvtcliu 2026-05-24 5/250 2026-05-24 10:16 by kudofaye
[教师之家] 论文撤稿了 +3 bjvtcliu 2026-05-24 5/250 2026-05-24 10:06 by Equinoxhua
[考博] 26/27申博自荐 10+4 ZXW0202 2026-05-22 9/450 2026-05-24 08:47 by bjvtcliu
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 hvkbtfonbv 2026-05-23 3/150 2026-05-24 08:01 by 9ps9vgkqva
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 pmo95bazuy 2026-05-23 7/350 2026-05-24 06:35 by fpo5ljpv91
[基金申请] 河北省自然科学基金 +5 Peterchao 2026-05-18 7/350 2026-05-23 16:57 by articlefan
[基金申请] 揭秘青基评审内幕：几个A才能顺利中标 +3 国自然国社科中 2026-05-23 4/200 2026-05-23 15:37 by 2000zf36392
[基金申请] 青B发送上会通知了吗 +5 chemBioBro 2026-05-22 7/350 2026-05-23 12:35 by zhuifengzhy
[考博] 博士申请 +3 焦晓明 2026-05-21 3/150 2026-05-23 11:26 by mlc840311
[文学芳草园] 献血感触 +7 呀呀好傻 2026-05-19 13/650 2026-05-21 20:15 by 呀呀好傻
[基金申请] 面上本子正文33页，违规吗？会被低分嘛？ +14 1234567wang 2026-05-17 16/800 2026-05-21 17:58 by 脆脆的饼干
[基金申请] 国自然评分 +4 无名者登山 2026-05-20 5/250 2026-05-21 16:35 by swuq
[基金申请] 国自然上会要求 +7 无名者登山 2026-05-18 11/550 2026-05-21 15:50 by draco1987
[基金申请] 提交了我也来说说感想 +9 fummck 2026-05-20 10/500 2026-05-21 14:17 by draco1987
[基金申请] 评审有感 +15 popular289 2026-05-18 26/1300 2026-05-21 10:35 by 西葫芦炒鸡蛋
[有机交流] 反应很差，大量原料没有反应 5+3 Mr.Zot 2026-05-19 8/400 2026-05-20 22:19 by Equinoxhua
[考博] 如果工作了想读博，可以边工作边读全日制嘛？ 30+3 铁达火车 2026-05-18 5/250 2026-05-20 09:33 by tfang
[考博] 博士申请 +5 星…… 2026-05-18 6/300 2026-05-18 23:49 by 糊糊涂涂好
[硕博家园] 我在等一个没有答案的答案 +3 Love_MH 2026-05-17 3/150 2026-05-18 02:22 by 竹林孤影
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭