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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » DNA模板 电泳都没有条带？
汕头大学海洋科学接受调剂
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cui00008

银虫 (初入文坛)

[交流] DNA模板 电泳都没有条带？

1%的琼脂糖电泳，缓冲液0.5X的TBE，染色剂用goldview一型的，跑出来marker比较淡，goldview二型的，marker比较亮，但是很模糊，条带不清晰。上样都是5ul。是哪里有问题？

加样DNA模板5ul，没加上样缓冲液，跑了多次都没看见条带。怎么回事呢？

模板DNA是从别处购买的，-80°冰箱放置一年了，期间有几次断电，会不会失活了？

本帖关键词：marker TBE 电泳 DNA 冰箱
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1楼 2009-12-03 09:24:10
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小小豆豆

金虫 (小有名气)
★ ★
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1949stone(金币+1,VIP+0): 12-3 17:41
电泳缓冲液是新的吗，用新的缓冲液试过吗
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2楼2009-12-03 09:43:47
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liyong1981

金虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
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1949stone(金币+3,VIP+0):有道理 12-3 17:41
原因分析
1.制胶的问题
2.缓冲液更换
3.你的maker都比较淡，说明电泳的问题很大，另：你的模板估计浓度很低~
希望对有有所帮助
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3楼2009-12-03 10:01:51
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一只鱼ddtt

银虫 (小有名气)
★
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支持楼上说的，制胶的时候一定让胶充分溶好。
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做个有风度的人
4楼2009-12-03 14:42:06
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linxi8579

铜虫 (正式写手)
★
1949stone(金币+1,VIP+0): 12-3 17:41
没加上样缓冲液？什么意思，不加上样缓冲液样品会沉到加样孔里吗，这样跑胶也许就不匀了吧。
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5楼2009-12-03 15:57:30
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ychh521

木虫 (小有名气)
★
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胶要充分凝固，应该用上样缓冲液的，不然DNA不会沉下去的，可以用EB做个对照，看是不是goldview的问题。
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6楼2009-12-03 18:12:45
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j2

木虫 (正式写手)
★
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不加上样缓冲液DNA沉不到空里去，怎么会跑出带来
条带模糊，但很亮？凝胶成像仪照图的时候调一下焦距试试
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修炼ｉｎｇ，当虫仙……
7楼2009-12-03 19:38:58
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xiongxiong5900

木虫 (小有名气)
★
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1.溶胶不充分
2.更换TBE
3.要加上样buffer，不然DNA会飘到TBE中，进不了胶的
4.也许是goldview的原因，效果确实不如EB
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8楼2009-12-04 10:35:52
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