| 查看: 1159 | 回复: 6 | |||
| 当前主题已经存档。 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
求问如何筛选确定G418抗性的GS115转化子并确定整合入GS115基因组的外源基因拷贝数
|
|||
|
今年开始做纤维素酶在毕赤酵母中的表达实验，还是完全的新手。最近进行到G418抗性筛选，看很多文献中都是说直接将转化子涂布到不同G418浓度的平板上就可以得到不同抗性的转化子。但在实际实验中，在较低G418浓度的平板上长出的转化子不仅有只能抗此浓度G418浓度的单菌，也包括能抗更高浓度G418的单菌。为了确定转化子抗性，将从不同抗性平板上得到的单菌依次点种到浓度由低到高的G418平板上，但可能由于点取的菌种密度过高，最后所有G418浓度的平板上均长出了单菌，未按照预想获得确定G418抗性的单菌。有些文献中有用荧光PCR，定量blot，southern 杂交等方法确定插入片段的拷贝数，但由于实验室条件限制，并不容易实现。在此向各位请教，有没有其他简易的方法可以筛选到确定G418抗性的转化子，确定整合入GS115基因组的外源基因拷贝数？可否传授下经验？如果有经验丰富的前辈，能不能留个联系方式大家互相交流下，本人将感激不尽！ 本帖关键词：GS115 G418抗性 拷贝数 |
回复此楼» 猜你喜欢
欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律
已经有52人回复
-
时间戳又变了8-15
已经有7人回复
-
售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急
已经有5人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有9人回复
-
哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？
已经有6人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急
已经有6人回复
-
售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有7人回复
-
售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有5人回复
-
filecode
已经有11人回复
-
售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急
已经有5人回复
3楼2009-12-02 18:35:33
zhaocy8903
木虫 (知名作家)
- 应助: 24 (小学生)
- 金币: 3822.5
- 散金: 1238
- 红花: 17
- 帖子: 5798
- 在线: 1468.5小时
- 虫号: 636507
- 注册: 2008-10-25
- 专业: 微生物遗传育种学
2楼2009-12-02 18:28:02
zhaocy8903
木虫 (知名作家)
- 应助: 24 (小学生)
- 金币: 3822.5
- 散金: 1238
- 红花: 17
- 帖子: 5798
- 在线: 1468.5小时
- 虫号: 636507
- 注册: 2008-10-25
- 专业: 微生物遗传育种学
4楼2009-12-02 20:15:02
5楼2009-12-03 11:13:09
