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heyugudu

银虫 (正式写手)


[资源] 【原创】关于HPLC仪器使用上的问题

最近用HPLC做的样,同一样品出峰面积相差很大,分析了很多原因,与大家一起分享一下。
1、进样器稳定性
进样器的稳定性偏差不能过大,用纯水走针后计算一下正负偏差都小于5%,所以排除了进样器的问题。
2、色谱柱
为了避免色谱柱出现问题,连续走了五天,换了五根柱子,出现的问题基本一致,应该不是柱子的问题。
3、流动相
因为使用的流动相用三乙胺调了PH,可能有部分盐析出,影响流动相的稳定性。
其次就是脱气,由于没有使用脱气机,脱气效果明显变差,有可能气泡进入柱子引起基线漂移,同时使柱压不稳。
现有条件下为了改善这种现象,应将流动相等放在仪器最上面,使气泡不容易进入泵,即使有小气泡,也会因为高度而飘浮回瓶内。流动相超声时间应延长。排气时应该观察是否排净。且配制流动相时一定要抽滤,可以使溶氧量降低,不易产生气泡。避免出现鬼峰。

以上是自己的一点经验。请大家多多指教。

本帖关键词:HPLC 气泡 基线 进样器 气机

[ Last edited by kidant on 2010-2-13 at 14:51 ]
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heyugudu

银虫 (正式写手)


感动哦,这是我第一次发帖,谢谢你
3楼2009-12-02 19:03:48
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canwor

银虫 (正式写手)


★★★ 三星级,支持鼓励

好不容易坐个沙发
2楼2009-12-02 18:43:09
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Frenkie_2001

木虫 (著名写手)


★ 一星级,一般


笨笨猪0608(金币+1,VIP+0):不排除脱气机会坏,我以前实验室的就坏了,很崩溃 12-4 08:11
HPLC仪器现在都有了脱气机了吧
5楼2009-12-04 00:14:32
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wangcaihao

木虫 (正式写手)



笨笨猪0608(金币+1,VIP+0):谢谢参与交流! 12-4 10:00
看看同一根柱子多次进样出峰时间是否稳定,看看每个峰的峰型是否正常不是矮胖的类型吧。
6楼2009-12-04 08:44:21
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