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【原创】关于HPLC仪器使用上的问题
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最近用HPLC做的样，同一样品出峰面积相差很大，分析了很多原因，与大家一起分享一下。 1、进样器稳定性 进样器的稳定性偏差不能过大，用纯水走针后计算一下正负偏差都小于5%，所以排除了进样器的问题。 2、色谱柱 为了避免色谱柱出现问题，连续走了五天，换了五根柱子，出现的问题基本一致，应该不是柱子的问题。 3、流动相 因为使用的流动相用三乙胺调了PH，可能有部分盐析出，影响流动相的稳定性。 其次就是脱气，由于没有使用脱气机，脱气效果明显变差，有可能气泡进入柱子引起基线漂移，同时使柱压不稳。 现有条件下为了改善这种现象，应将流动相等放在仪器最上面，使气泡不容易进入泵，即使有小气泡，也会因为高度而飘浮回瓶内。流动相超声时间应延长。排气时应该观察是否排净。且配制流动相时一定要抽滤，可以使溶氧量降低，不易产生气泡。避免出现鬼峰。 以上是自己的一点经验。请大家多多指教。 本帖关键词：HPLC 气泡 基线 进样器 气机 [ Last edited by kidant on 2010-2-13 at 14:51 ] |
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