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elalei1999铜虫 (小有名气)
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引物求助
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Xba1-R:gct cta gat caa acN acN ggN gtt aaN aga g Sma1-F:tcc ccc ggg atg gag gcg atH ggN gtt Ytg atg， 上下引物如上。Tm值相差10，采用了温度梯度50-55，退火时间30s，PCR后没有目的基因条带出现。只是在53度的二聚体较亮，其他次之。自己分析问题有以下：1、引物问题。引物过长，Tm值相差过多 2、模板问题。RNA提取有污染，降解，反转后的质量差。 请大伙指点迷津。谢谢。 |
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