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glzeng金虫 (小有名气)
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[交流]
求助凝胶填料
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我最近在用聚合的方法做一个高分子水溶性多肽，重均分子量为7-8KDa，要求分离得到分子量小于2KDa的组分含量小于2.5%，分子量大于40KDa的组分含量小于2.5%。以前我一直都是用Sephadex G50来进行分离，由于凝胶颗粒比较小，分离效果还不错，做得挺好的。小试做好了之后现在要进行中试，合成规模在10-20g。我把柱子换成了600*35，600*45mm，装上Sephadex G50后发现凝胶严重变形了，流速非常慢，无法使用，考虑到如果换成颗粒比较大一点的，又怕柱效不好，本来柱子就有些短了。后来换了个Sephadex G25，颗粒比较粗一些的，流速是够快，但是分离效果很差，还不如G50。分子量小于2KDa的组分含量总是在10%左右。这部分小分子组分的结构和我要的产品几乎完全相似，只是主链的长度小一点而已。我想离子交换应该是搞不定的吧。现在都不知道该咋整了。 这两天查了不少文献，对这个产品有两篇文献介绍了纯化方法，不知道效果怎么样。一个是采用Fractogel TSK HW55（600*26）上样量为20mg*30ml，这个凝胶听说流速不错，但是没用过，也只是在文献里见过，美国产的，不知道有没有人用过。有的话介绍一下吧，价格，分离效果如何，是否合适放大等等（没查到它的商家信息）。另外一种方法是超滤，采用5KDa的滤膜，文献介绍好像要操作很多遍才行，这种方法没用过，如果做10g产品（粗品算20g吧，水溶性很不错的），那得需要多大的超滤膜呢？超滤膜可以重复使用吗？是否会因为操作的次数增多而堵住啊？ 如果两种方法的都可以用的话，那么那种方法更适合放大呢？请教高手，如果在这里说不清楚，留个qq：63409171，非常希望能与大家交流，共同进步！ |
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