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mourning

木虫 (正式写手)

[交流] 双酶切的载体也能自连……

如题,不相干的位点了,也能自连起来,不可思议,转化效率还很低,不知连接体系是不是有问题,怎么办呢?
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


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酶切不彻底,或者酶切的黏端降解成平端自连
7楼2009-11-29 10:18:16
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查看全部 12 个回答

zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)

★ ★ ★
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amisking(金币+2,VIP+0): 11-29 08:53
引用回帖:
Originally posted by mourning at 2009-11-28 17:24:
如题,不相干的位点了,也能自连起来,不可思议,转化效率还很低,不知连接体系是不是有问题,怎么办呢?

双酶切的载体一般是不会发生自连的,你用的是不是同尾酶呢?
你判断的转化效率低是不是阳性转化板和阴性对照长出的克隆数差不多呢?如果是的话应该是连接的有问题。
2楼2009-11-29 01:01:09
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zhaocy8903

木虫 (知名作家)

有一个位电没有切好
3楼2009-11-29 07:22:01
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j2

木虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+1,VIP+0): 11-29 22:41
去磷酸化吧
理论上不该连,但实际就是有,我也奇怪为什么,望高手指点
修炼ing,当虫仙……
4楼2009-11-29 09:26:53
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