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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 去磷酸化体系
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lij2

金虫 (小有名气)

[交流] 去磷酸化体系

最近要将载体去磷酸化，用TOYOBO的碱性磷酸酶，找不到说明书了，不知道体系是怎么样的，请用过的同仁指点一下，体系怎样，作用多久，谢谢~
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1楼 2009-11-27 12:15:21
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j2

木虫 (正式写手)
同问去磷酸化~~~
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修炼ｉｎｇ，当虫仙……
2楼2009-11-27 17:18:15
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lij2

金虫 (小有名气)
都没用过吗？
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3楼2009-11-28 12:56:16
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zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)
★ ★ ★
amisking(金币+2,VIP+0): 11-28 22:17
lij2(金币+1,VIP+0):请教一下有用50℃的是怎么回事？ 11-29 09:16
以20总体系为例：
CIAP Buffer：4ul
CIAP：4ul
dd水：17-12ul
酶切过的质粒：15-20ul
30℃ 30min，37℃ 30min。
质粒的量根据浓度做相应的变化。
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4楼2009-11-28 22:13:33
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zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)
★
lij2(金币+1,VIP+0):谢谢，最后一个问题，质粒的量是多少，不会不管浓度吧？！ 11-30 10:51
50℃效率也很高，可能个人习惯不一样吧！50℃也可以的。
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5楼2009-11-29 12:18:00
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zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)
★
lij2(金币+1,VIP+0):拜谢~ 12-1 13:11
去磷的时候质粒我没有定过量，只是按照经验，跑胶的时候如果质粒带比较亮浓度比较大就少加一点40体系加个15ul左右吧，如果浓度比较低的话就多加点，毕竟去磷后的损失还是蛮大的。
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6楼2009-11-30 21:58:49
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