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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 聚丙烯酰胺非变性胶电泳，电泳带向中间聚拢，不知何原因？
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pal2004

木虫 (正式写手)

[交流] 聚丙烯酰胺非变性胶电泳，电泳带向中间聚拢，不知何原因？

总是两侧的电泳带向中间聚拢，各个孔的电泳带跑着跑着就挤在一起了，而且两侧比中间要快，不知那位虫子知道原因。
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1楼 2009-11-25 11:16:56
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laojiu9878

至尊木虫 (知名作家)

九牛
看看电泳仪正常吗？
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但愿人长久
2楼2009-11-26 08:02:29
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小小豆豆

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
在别的电泳仪上试一下，还是有问题就是胶的问题。
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3楼2009-11-26 09:33:22
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liyong1981

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
这种问题，很大程度上是你做胶的原因。
丙烯酰胺胶的制备很重要，当你灌胶的时候，要确保玻璃之间均匀，不能有气泡，这个是个技术活，熟能生巧的，而且一定要水平。胶配置的时候，确保每个成分都溶解完全。

电泳仪也有可能有问题，另外你的缓冲液要确保没问题，不要拿原液去跑，

希望对你有帮助~
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4楼2009-11-26 10:27:49
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pal2004

木虫 (正式写手)
谢谢2.3.4楼的虫友。
我用的是BioRad的Mini-PROTEAN 3 Cell电泳槽，因为同时能跑两块板，所以我就用两块同一次配的胶跑了一下，20%的非变性胶，140V恒压。
结果发现，两块胶跑出的带的弯曲性状一样，像个镜面一样。
如果是胶的问题，那么出现上述情况的可能性很小吧。
但是有一个情况就是，电泳槽装好后，上槽一直缓慢漏液，上槽电泳缓冲液的液面缓慢下降会不会对跑出的条带有影响？
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5楼2009-11-26 12:13:44
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liyong1981

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
漏液肯定会有影响了，建议换个好的设备试试，伯乐的没用过，六一的用得很好，又便宜，电压不要开太大
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6楼2009-11-26 14:07:19
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