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pal2004

木虫 (正式写手)

[交流] 聚丙烯酰胺非变性胶电泳,电泳带向中间聚拢,不知何原因?

总是两侧的电泳带向中间聚拢,各个孔的电泳带跑着跑着就挤在一起了,而且两侧比中间要快,不知那位虫子知道原因。
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laojiu9878

至尊木虫 (知名作家)

九牛

看看电泳仪正常吗?
但愿人长久
2楼2009-11-26 08:02:29
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小小豆豆

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
在别的电泳仪上试一下,还是有问题就是胶的问题。
3楼2009-11-26 09:33:22
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liyong1981

金虫 (正式写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
这种问题,很大程度上是你做胶的原因。
丙烯酰胺胶的制备很重要,当你灌胶的时候,要确保玻璃之间均匀,不能有气泡,这个是个技术活,熟能生巧的,而且一定要水平。胶配置的时候,确保每个成分都溶解完全。

电泳仪也有可能有问题,另外你的缓冲液要确保没问题,不要拿原液去跑,

希望对你有帮助~
4楼2009-11-26 10:27:49
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pal2004

木虫 (正式写手)

谢谢2.3.4楼的虫友。
我用的是BioRad的Mini-PROTEAN 3 Cell电泳槽,因为同时能跑两块板,所以我就用两块同一次配的胶跑了一下,20%的非变性胶,140V恒压。
结果发现,两块胶跑出的带的弯曲性状一样,像个镜面一样。
如果是胶的问题,那么出现上述情况的可能性很小吧。
但是有一个情况就是,电泳槽装好后,上槽一直缓慢漏液,上槽电泳缓冲液的液面缓慢下降会不会对跑出的条带有影响?
5楼2009-11-26 12:13:44
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liyong1981

金虫 (正式写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
漏液肯定会有影响了,建议换个好的设备试试,伯乐的没用过,六一的用得很好,又便宜,电压不要开太大
6楼2009-11-26 14:07:19
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