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wangwupeng

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助】大孔树脂富集黄酮类的如何操作

各位好请教大家几个问题:
1,如果要富集一种药物中总黄酮,以前没有人做过这这种植物中总黄酮的富集(或精制)的工艺,我们实验室只有西安蓝晓科技的seplite LX-38大孔树脂,我洗脱时按照人家文献上说的那种先蒸馏水洗,再用乙醇洗脱行不行?(老板为省钱,不想再买树脂,就这树脂也是我师姐当时蓝晓搞活动时人家赠的)

2.我今天早上用小柱子做了次预处理大孔树脂,用乙醇浸泡过的大孔树脂装柱,用蒸馏水洗,可是大孔树脂飘了起来,以后不是还要液体上样吗,我怕这个把大孔树脂冲起来的问题解决不了,后面的液体上样又被冲起来,使实验受影响?听同学的同学说预处理后再把大孔树脂倒出来重新上柱,这样她说液体上样就不会冲起来,是这样吗?

3.我看文献说从药材里提出来的物质都要过滤下,用清夜上柱,我老板死活不让过滤,说这样损失太厉害。问下大家都是用滤纸过滤的吗?

4.洗脱下来的物质大家都是怎么检验又没有黄酮类物质的,是根据理化性质中的“显色反应”还是紫外可见分光光度器测得吸光度?
5.我所做的事师姐把浸膏经硅胶柱,石油醚洗脱,乙酸乙酯,乙醇洗脱的“乙醇层”。

总之,我们的实验条件有限,做个工艺我想,老师不喜欢,他对提取也不了解很多,一种中药搞了十年,还是没成系统。所以带出来这么多问题,希望大家把知道的都跟我说下,当然,涉及自身秘密的就免了。我在这里不胜感激
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匿名

用户注销 (文坛精英)


★ ★ ★
wangwupeng(金币+2,VIP+0):谢谢帮助 11-25 11:20
472514568(金币+1,VIP+0):奖励积极回帖! 11-27 18:01
本帖仅楼主可见
4楼2009-11-25 06:11:29
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lgcll

铜虫 (初入文坛)

★ ★ ★
karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢回复! 11-24 20:08
472514568(金币+1,VIP+0):奖励积极回帖! 11-24 23:09
wangwupeng(金币+1,VIP+0):同行 11-25 11:18
我也正在做差不多的工作,都不知道从哪入手,
我现在是想从药材直接提取做个整套的工艺,有空多交流啊!!
黄酮类我看文献,好像很多都是醇提后回收乙醇,再开始上柱子的。
2楼2009-11-24 17:10:47
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蒙面礼服侠

木虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★
472514568(金币+1,VIP+0):奖励积极回帖! 11-24 23:09
wangwupeng(金币+3,VIP+0):谢谢帮助 11-25 11:19
给小小意见:
(1)相关文献如果报道用水洗除杂,再用不同梯度乙醇洗脱的话,可以尝试。在企业生产中,乙醇和水的洗脱方式是最好的选择
(2)第二个问题没听明白。如果是说加液时,上端的树脂被冲起,请用滴管沿着柱壁慢慢加。也可以剪个滤纸放在树脂上面。如果是呈断层样整段飘起,可能是乙醇和水混合时造成,试试,处理完树脂后,用水装柱。如果是装柱完已经有一些树脂飘在上面,可能是颗粒已被破坏的树脂,应该除去
(3)如果你的样品是溶于你的溶质,过滤应该也没问题吧
(4)检验洗脱液里面含不含黄酮,显色法和紫外都可用,紫外还可监控洗脱液中黄酮含量,可做洗脱曲线
3楼2009-11-24 23:07:20
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xuming896

金虫 (小有名气)

★ ★ ★
wangwupeng(金币+2,VIP+0):谢谢帮助 11-25 11:20
472514568(金币+1,VIP+0):奖励积极回帖! 11-27 18:02
回答:
1.洗脱时用不同浓度的乙醇,乙醇浓度由低到高。
2.乙醇到水转换时用不同的梯度的醇转换,因为树脂在不同浓度的醇里膨胀系数不一样,直接转肯定不行。
3.不过滤就堵柱子,堵了没柱效,就毁柱子,先和老板说清楚。
4.一般是浓硫酸乙醇显色,在网上搜下怎么配。
5楼2009-11-25 08:15:34
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