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sugar-tang

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助】蛋白酶活性测定问题

请问各位大侠,蛋白酶活性测定最经典的方法是不是Folin-酚试剂法,Folin-酚试剂分为A和B,这两种试剂的作用是否相同?是不是必须要混合后才是Folin-酚试剂?
谢谢大家!
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多学习,多收获
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~明晓溪~

木虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★
1949stone(金币+2,VIP+0): 11-24 18:11
sugar-tang(金币+3,VIP+0):配制过程的确是很麻烦,非常感谢! 11-25 15:29
Folin酚试剂的配制
试剂甲:
A液:
Na2CO3  10.00g NaOH 2.00g
酒石酸钾钠(或钾盐钠盐) 0.25g
混合、溶于500ml蒸馏水中。

B液:

CuSO4·5H2O  0.5g

H2O 100.00ml

用前将A液50份与B液1份混合即为试剂甲。

试剂乙:

于磨口回流瓶加入下列试剂

钨酸钠Na2WO4·2H2O 100.00g

钼酸钠NaMoO4·2H2O 25.00g

H2O 700.00ml

85%H3PO4 50.00ml

浓HCl 100.00ml

按上回流冷凝管以小火回流10h后再加:

硫酸锂 150.00g

H2O 50.00ml

溴水 数滴

开口继续沸腾15min,驱除过量的溴,冷却后溶液呈黄色微带绿色(如仍呈绿色,须重复滴加液体溴步骤)。稀释至1L,过滤,滤液置于棕色瓶保存。使用时用标准NaOH液滴定,以酚酞为指示剂,然后适当稀释(加水约1倍)使最终浓度为1mol/L。(真的很麻烦呀,怪不得要500大元才能买到一瓶)
3楼2009-11-24 13:34:26
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yangxx1988

铜虫 (初入文坛)


sugar-tang(金币+1,VIP+0):谢谢! 11-25 15:29
Folin—酚试剂由甲试剂和乙试剂组成必须要混合后使用
4楼2009-11-24 15:43:29
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1949stone

荣誉版主 (知名作家)

海纳百川


sugar-tang(金币+1,VIP+0):谢谢! 11-25 15:30
这个方法是药典认可的 可以做标准的
海纳百川止于至善
5楼2009-11-24 18:12:28
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