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sugar-tang

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[交流] 【求助】蛋白酶活性测定问题

请问各位大侠，蛋白酶活性测定最经典的方法是不是Folin-酚试剂法，Folin-酚试剂分为A和B，这两种试剂的作用是否相同？是不是必须要混合后才是Folin-酚试剂？
谢谢大家！

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多学习，多收获

1楼 2009-11-24 11:22:34

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chenyyy

无虫 (正式写手)

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买folin试剂吧

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2楼2009-11-24 13:28:25

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~明晓溪~

木虫 (正式写手)

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★ ★ ★ ★ ★
1949stone(金币+2,VIP+0): 11-24 18:11
sugar-tang(金币+3,VIP+0):配制过程的确是很麻烦，非常感谢！ 11-25 15:29

Folin酚试剂的配制
试剂甲：
A液：
Na2CO3 10.00g NaOH 2.00g
酒石酸钾钠（或钾盐钠盐） 0.25g
混合、溶于500ml蒸馏水中。

B液：

CuSO4·5H2O 0.5g

H2O 100.00ml

用前将A液50份与B液1份混合即为试剂甲。

试剂乙：

于磨口回流瓶加入下列试剂

钨酸钠Na2WO4·2H2O 100.00g

钼酸钠NaMoO4·2H2O 25.00g

H2O 700.00ml

85％H3PO4 50.00ml

浓HCl 100.00ml

按上回流冷凝管以小火回流10h后再加：

硫酸锂 150.00g

H2O 50.00ml

溴水数滴

开口继续沸腾15min，驱除过量的溴，冷却后溶液呈黄色微带绿色（如仍呈绿色，须重复滴加液体溴步骤）。稀释至1L，过滤，滤液置于棕色瓶保存。使用时用标准NaOH液滴定，以酚酞为指示剂，然后适当稀释（加水约1倍）使最终浓度为1mol/L。(真的很麻烦呀，怪不得要500大元才能买到一瓶)