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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 【求助】关于中药HPLC的问题，百思不得其解啊！
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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kikie11111

木虫 (知名作家)

[交流] 【求助】关于中药HPLC的问题，百思不得其解啊！

这两周一直在做HPLC，用的是waters的液相，反向C18柱，流动相是乙腈水溶液，紫外检测器，检测物质是皂苷类，检测波长为203nm，接近紫外末端吸收。现在出现一个奇怪的现象，就是每当我进样结束后冲柱子，冲柱条件是：0-20min，5%-100%乙腈；20-25min，100%乙腈；25-35min，100%-5%乙腈（我怕柱子冲不干净，所以梯度冲柱），在30min时总会出现一个色谱峰，峰高最低0.25，最高达到2，用标品进样后，采用的色谱条件下不出峰，在冲柱的30min时出峰，我很诧异，我以为是柱子没洗干净，我用这个冲柱条件连冲了三遍，都是在30min时出现一个峰高0.25左右的峰，这个“鬼峰”不可能是杂质，因为都冲了三遍柱子了，那它是什么？溶剂峰吗？还是其他什么？现在我很疑惑，也很郁闷，小木虫上的牛人多，大家帮忙解决下吧！

[ Last edited by kikie11111 on 2009-11-24 at 21:02 ]
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1楼 2009-11-23 20:40:33
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kikie11111

木虫 (知名作家)
不会没人知道是什么原因吧？那我惨了。。。。。
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2楼2009-11-24 09:27:53
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diannao001

铁杆木虫 (小有名气)
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louyiceng(金币+1,VIP+0): 11-24 12:28
lcyhappy(金币+0,VIP+0):谢谢分享 11-24 14:31
首先要确定一下，你的样品在此流动相中的溶解度怎么样？你的样品是怎么配制的？会不会出现样品中成分滞留现象。
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3楼2009-11-24 10:29:52
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wenzhiyong16

木虫 (小有名气)
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louyiceng(金币+1,VIP+0): 11-24 12:28
lcyhappy(金币+0,VIP+0): 11-24 14:31
从100%的乙腈下降时，，乙腈与水混合，会产生溶剂峰的，，可能30分钟时比例变化大的原因。
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4楼2009-11-24 12:26:46
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kikie11111

木虫 (知名作家)
我的样品是用纯甲醇溶解，然后微滤的，流动相是乙腈水溶液。样品中成分滞留现象是什么意思？意思是我的样品在乙腈中溶解不好是吗？
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5楼2009-11-24 12:34:12
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wenzhiyong16

木虫 (小有名气)
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jw227(金币+1,VIP+0):谢谢参与 11-24 15:12
你的柱子洗脱条件是怎么样的啊，，感觉溶解不好就不会在冲柱子时候一下子出来这么个大峰
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6楼2009-11-24 12:40:48
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wenzhiyong16

木虫 (小有名气)
你的柱子洗脱条件是怎么样的啊，洗衣脱条件应该也是乙腈和水吧，感觉溶解不好就不会在洗衣脱时不出，而在冲柱子时候一下子出来这么个大峰，，你洗脱时不是梯度吗？？
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7楼2009-11-24 12:45:12
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kikie11111

木虫 (知名作家)
你的意思是乙腈的溶剂峰？那怎么处理啊？我的标品也跟那个溶剂峰一起出来的，主要是我的标品的波长是203nm跟乙腈的波长很接近。。。。
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8楼2009-11-24 12:51:21
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kikie11111

木虫 (知名作家)
洗脱条件还在考察啊，也是用梯度洗脱，但是都是从低浓度乙腈到高浓度乙腈，样品出峰还不错，但是标品竟然不出峰，太诡异了！
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9楼2009-11-24 13:02:49
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ccbright1016

金虫 (正式写手)
★
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lcyhappy(金币+0,VIP+0): 11-24 14:33
溶解样品的溶剂得溶解性要小于流动相得溶解性。如果大于将会有样品析出。出峰。这是不允许的。
检测池多久没洗了？
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10楼2009-11-24 13:26:15
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