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汕头大学海洋科学接受调剂
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ym3612003

铁杆木虫 (著名写手)

修己 慎独 思勤

[交流] 请问菌落PCR产物可以直接用于酶切吗?

各位高手专家,我想对菌根真菌18S gene建库,请问下我能不能在挑单菌落后直接进行菌落PCR,并用菌落PCR产物进行酶切鉴定?请各位大侠不惜赐教。谢谢啦。
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最想要去的地方,怎能在半路就返航!!!
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王雨云

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我也想问一下,如果菌落PCR的结果是目的基因是否就不用做酶切鉴定了,感觉如果菌落PCR的结果是目的基因就可以直接穿刺测序了,节省试验时间,呵呵!
9楼2009-11-23 15:23:58
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laojiu9878

至尊木虫 (知名作家)

九牛


1949stone(金币+1,VIP+0): 11-23 09:26
胶回收再切才可以。
但愿人长久
3楼2009-11-23 08:31:32
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anik

银虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1949stone(金币+3,VIP+0):谢谢教诲 11-23 09:26
为何那么懒呢?
我对你所选取的步骤表示怀疑:
1、PCR结果,你如何能保证就是你的目的片断?
2、PCR为体外扩增,存在错配,如果正好是你的酶切位点的碱基变化,酶切不出来,那么就就是假阴性。
3,用PCR的结果进行酶切,其目的为何?能否证明你的问题?
4楼2009-11-23 08:40:44
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09021122

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1949stone(金币+2,VIP+0):谢谢 11-23 09:26
一般情况下菌落PCR只是检测你挑的单克隆是否是阳性
而非用于基因的扩增,挑克隆摇菌才是扩增基因啊
雄关漫道真如铁,而今迈步从头越
5楼2009-11-23 08:45:50
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