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sugar-tang

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助】HPLC谱图拖尾严重的原因

请教各位高手,我做的黄芩苷化学成分的测定,HPLC谱图中主峰拖尾严重,什么原因会导致拖尾呢?

[ Last edited by sugar-tang on 2009-11-22 at 12:10 ]
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sugar-tang

金虫 (小有名气)

因为图片粘贴不到帖子上,我把图传到附件里了,前两个是拖尾比较严重的。谱图效果不好,试验当天基线没有调到0,恒温箱一直坏着,所以柱温无法设定,还有就是泵的压力比较高,达到了12Mpa左右。
多学习,多收获
2楼2009-11-21 18:03:54
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junjun203

木虫 (正式写手)

★ ★
happy169(金币+1,VIP+0):谢谢参与,欢迎常来分析版! 11-22 11:28
sugar-tang(金币+1,VIP+0): 11-22 12:09
流动相是什么呢,你可以试着加些铵盐看看
3楼2009-11-21 18:21:14
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lindar1234

金虫 (正式写手)

★ ★
happy169(金币+1,VIP+0):谢谢参与,欢迎常来分析版! 11-22 11:28
sugar-tang(金币+1,VIP+0): 11-22 12:09
泵的压力比较高,可能堵了,多冲冲,要不你的样品不干净,要不流动相没过滤。
峰拖尾的话,试图往你的水中加点三乙胺,可以调峰型的。
有些事情我们本身无法控制,就只能控制自己了。
4楼2009-11-21 18:36:02
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sugar-tang

金虫 (小有名气)

[quote]Originally posted by junjun203 at 2009-11-21 18:21:
加入铵盐可以修整峰型吗?一般加那种铵盐呢?
多学习,多收获
5楼2009-11-22 10:31:08
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sugar-tang

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by junjun203 at 2009-11-21 18:21:
流动相是什么呢,你可以试着加些铵盐看看

加入铵盐可以修整峰型吗?一般加那种铵盐呢?
多学习,多收获
6楼2009-11-22 10:31:58
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sugar-tang

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by lindar1234 at 2009-11-21 18:36:
泵的压力比较高,可能堵了,多冲冲,要不你的样品不干净,要不流动相没过滤。
峰拖尾的话,试图往你的水中加点三乙胺,可以调峰型的。

三乙胺加入的比例是多少呢?怎样加入比较好,是直接加到已有的流动相里吗?
多学习,多收获
7楼2009-11-22 10:35:50
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honghao-li

铜虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★
happy169(金币+1,VIP+0):谢谢参与,欢迎常来分析版! 11-22 11:29
happy169(金币+0,VIP+0):应该没花钱吧!楼主发的图片没有设置金币吧!! 11-22 11:30
sugar-tang(金币+3,VIP+0):我发的图片没有设置金币,呵呵。非常感谢! 11-22 11:51
花钱看了一下你的谱图,感觉应该是你流动相的问题,但不知你流动相的组成是什么?能方便说一下吗?
你可以加一点磷酸盐试试(磷酸二氢钠或钾、铵都行)浓度控制在0.02-0.03mol/L就行,用磷酸调PH3.0或3.5试试。至于流动相比例,你可根据实际情况做调整。
8楼2009-11-22 11:03:10
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sugar-tang

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by honghao-li at 2009-11-22 11:03:
花钱看了一下你的谱图,感觉应该是你流动相的问题,但不知你流动相的组成是什么?能方便说一下吗?
你可以加一点磷酸盐试试(磷酸二氢钠或钾、铵都行)浓度控制在0.02-0.03mol/L就行,用磷酸调PH3.0或3.5试试。至 ...

我的流动相是甲醇:水:冰醋酸=47:53:0.2,但实际操作时就是先过滤了水和甲醇,然后在600水中加入了636µL冰醋酸(不知这样是否符合比例要求,主要是怕冰醋酸的水腐蚀滤膜),能不能只是把冰醋酸换成磷酸?加入盐是不容易堵柱子呢?谢谢~~
多学习,多收获
9楼2009-11-22 12:02:23
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honghao-li

铜虫 (小有名气)


ludasheng-1(金币+1,VIP+0): 11-22 12:21
盐的浓度只要不是很大,是不会堵柱子的,只要测完样后用10%甲醇水先冲30分钟以上就可以把盐冲掉,然后再用纯甲醇冲柱子30分钟以上就行。
可以把乙酸换成磷酸盐试试,也可以把甲醇换成乙腈试试。
10楼2009-11-22 12:13:00
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